酶联生物给您讲解ELISA试剂盒变质的因素

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1.方法学的影响

ELISA测定模式包括以下几种:双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法，其中竞争抑制法(HBeAb, HBcAb等采用)因受操作时差所引起的竞争等因素的影响，结果重复性较差，质里较难控制。

2.试剂因素

不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量一致，即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差异，因此必须选择和订购长批号的试剂，并保证保存条件。严格执行这一标准可以避免因试剂批号改变而重新建立质控体系及重新评估试剂的复杂过程，并且能够保证结果的稳定性;对于效期短、使用率低的试剂，应当小里分装，每次使用则取分装部分即可，避免反复冻融造成试剂的失效。

3.样本因素

标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素，前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体等，后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。

4.操作因素

ELISA操作步骤复杂，操作不当将引起较大的误差。加样、温育、洗涤、显色、比色。

5.灰区的设置

通常情况下，ELISA定性实验以“阳性"和“阴性"来报告结果，两者间有-条分界线被称为“阳性判断值"(cut-off value， Co值)，这是定性免疫测定结果报告的依据。

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