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上海博湖生物科技有限公司
羊源性成分(Ovine)核酸检测试剂盒说明书中含有聚合酶链式反应所需要各种试剂组分,如:引物、dNTPs、缓冲液、Taq酶等,PCR反应液混合液中加入检测样品,即可进行PCR扩增反应。PCR扩增产物经琼脂糖电泳染色判断,阳性样本将在相应大小的片段处出现特异性条带。
产品名称:羊源性成分(Ovine)核酸检测试剂盒说明书
规格:48T/盒
编号:BH-P4836
分类:荧光-PCR法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
规格及成分:
产品名称成 分 编 号 十孔盒包装
MMLV 逆转录酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀剂 50903 400 μL
TdT(末端转移酶) 120312 10 μL
2×TdT Buffer(含 dATP) 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0(含染料) 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手册 101105sc 1 份
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器*的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,大吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的大吸收光谱在 500nm,大发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
人脐动脉内皮细胞RNAHUAEC miRNA5 μg硫酸*质量规格:含量≥670µg/mgIsepamicine Sulphate
G401细胞,人肾癌Wilms细胞 大鼠垂体细胞,RPC细胞 CL-0462UMR-106(大鼠骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2蓓萨罗丁;贝沙罗汀质量规格:>99%Bexarotene
HCC94(人子宫鳞癌细胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2氯前列醇钠(D型)质量规格:>98.5%D-Cloprostenol sodium
hCD133+-CB-c single donor 从脐带血提取的人类CD133+祖细胞(hCD133+-CB),单一捐献者 100000 大鼠垂体细胞RPC氯前列醇钠(DL型)质量规格:>98.5%,USP34DL-Cloprostenol sodium
CSC, 小鼠心肌细胞*(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Ligustrazine HCl
人角膜上皮细胞*培养基 100mL二甲基亚砜(AR,>99%(GC)) Dimethyl sulfoxide质量规格:AR,>99%(GC)
HPT-8细胞,小鼠饲养层上皮细胞 293(转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞) 长白山猪胚胎皮肤成纤维样细胞;201184二甲基亚砜(>99.8%(GC)) Dimethyl sulfoxide质量规格:>99.8%(GC)
EFNB2 Protein Human 重组人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 标签)二甲基亚砜(分子生物学,≥99.9%) Dimethyl sulfoxide质量规格:分子生物学,≥99.9%
EA.hy926(人脐静脉细胞融合细胞) 5×106cells/瓶×2 大隐静脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)二甲基亚砜(多肽合成) Dimethyl sulfoxide质量规格:多肽合成
人脑微血管内皮细胞HBMEC二甲基亚砜(药用级) Dimethyl sulfoxide质量规格:药用级
羊源性成分(Ovine)核酸检测试剂盒说明书QGY-7701(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸组氨瑞林 Histrelin Acetate质量规格:BR,度>98%
人结直肠腺癌细胞;COLO 205*V钾Penicillin V potassium salt质量规格:1440~1680 U/mg,BR
CD47 Others Human 人 CD47 人细胞裂解液 (阳性对照) 2'-脱氧*2'-deoxyinosine质量规格:>98%,BR
mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓*Nifekalant hydrochloride质量规格:>98%,BR
3T3TK细胞,小鼠成纤维细胞 TNFa转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3-VP16-TNFa细胞 人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg*(标准品)Nifekalant hydrochloride质量规格:HPLC>99%,标准品
注意事项:
①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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