猪多肽YYelisa检测试剂盒 操作步骤
1.加样：分别设标准孔、待测样品孔、空白孔。设标准孔 7 孔，依次加入 100μL 不同浓度的标准品 （见试剂准备 2）。空白孔加 100μL（见试剂准备第二步*后一管），余孔加待测样品 100μL，酶标板加上覆膜，37℃ 温育 2 小时。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。
3.每孔加检测溶液 A 工作液 100μL（临用前配制），酶标板加上覆膜，37℃ 温育 1 小时。
4.弃去孔内液体，每孔用 300μL 的洗涤液洗涤，浸泡 1-2 分钟，吸去 （不可触及板壁） 或甩掉酶标板内的液体，在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次 （也可轻拍将孔内液体拍干），重复洗板 3 次。*后一次洗涤后，要把孔内的洗涤液*甩干。自动洗板机亦可。
5.每孔加检测溶液 B 工作液 （临用前配制）100μL，加上覆膜，37℃ 温育 1 小时。
6.弃去孔内液体，甩干，洗板 5 次，方法同步骤 4。
7.每孔加底物溶液 90μL，酶标板加上覆膜，37℃ 避光显色 （反应时间控制在 15-25 分钟，不要超过 30 分钟。当标准孔的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色，后 3-4 孔梯度不明显时，即可终止）。
8.每孔加终止溶液 50μL，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。如出现颜色不匀一，请轻轻晃动酶标板以使溶液混合均匀。
9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后，立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 （O.D. 值）。
