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大鼠内脏脂肪细胞操作说明

阅读:190发布时间:2019-11-20

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                            大鼠内脏脂肪细胞操作说明

11月里,冷风吹起,群叶舞作一片圣洁的繁华,落了。心如叶恋树般的回忆,哪一年的故事,结束在这个秋天,哪一个人,让我流恋忘返。11月里,霜雾缠绵,纠结着晨与阳光,我与我的心莲。接下来介绍 大鼠内脏脂肪细胞操作说明

以下方法:

1弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

主要功能:

(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。

(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。

(3)与血管疾病的进展和稳定有关。

 生理变化:

(1)主动脉硬化。

(2)主动脉瘤

(3)主动脉钙化。

基本特性:

(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。

(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。

(3)原代细胞培养末期液氮冻存。

(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。

(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。

(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。


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