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上海博湖生物科技有限公司
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阅读:229发布时间:2019-11-06
说话间日子就过去,前几天还一直在担心光棍节要怎么过。一下也就快到12月了,家里来说天气变得冷了要多穿衣服,不要感冒了。于是把枕头抱的更紧了,这里的冬天时温暖的。接下来介绍 鸡 C3SP elisa检测试剂盒操作流程
试剂准备:
1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
操作过程:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的*标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。
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