上海古朵生物科技有限公司

古朵生物:免疫组化遇到的问题及其解决办法 ​​​​​​​

时间:2023-10-24阅读:246
分享:

免疫组化遇到的问题及其解决办法
 

1、染色过强

 

原因

解决办法

抗体的浓度过高或抗体孵育时间过长降低抗体滴度(一般指浓缩性抗体)抗体孵育时间:室温1小时或4℃过夜
孵育温度过高,孵育温度超过37℃一般室温20-28℃
DAB显色时间过长或DAB浓度过高显色时间不能超过5-10分钟,以显微镜下观察为准

2、非特异性背景染色

 

原因

解决办法

操作过程中冲洗不充分每步冲洗3×5
组织中含过氧化物酶未阻断可再配置新鲜3%H2O2封闭,孵育时间延长
组织中含内源性生物s正常非免疫动物血清再封闭
血清蛋白封闭不充分延长血清蛋白封闭时间

3、染色弱

 

原因

解决办法

抗体浓度过低,孵育时间过短提高抗体浓度,孵育时间不能少于60分钟
试剂超过有效使用期及时更换试剂
操作中,滴加试剂时缓冲液未沥干,致使试剂稀释每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液(但防止切片干燥)
室温太低,低于15℃若室温低于15度,要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟(或4℃冰箱过夜)
蛋白封闭过度封闭时间不要超过10分钟

4、染色阴性

 

原因

解决办法

操作步骤错误重新试验,设立阳性对照
组织中无抗原设立阳性对照片,以验证实验结果
一抗与二抗种属连接错误仔细确定一抗与二抗种属无误


抗体上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。古朵试剂盒

标签:抗体 试剂 血清蛋白 缓冲液 古朵生物 二抗 一抗


会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

X
该信息已收藏!
标签:
保存成功

(空格分隔,最多3个,单个标签最多10个字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~

以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,智慧城市网对此不承担任何保证责任。

温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。

在线留言