胎牛血清用途及相关知识详解?

　　血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。

　　胎牛血清(FBS)是常用的血清添加剂，因为它富含生长因子、蛋白和大分子。尽管无血清和非动物来源的培养基也逐渐走红，但许多细胞系未必适用，并且存在费用较高和生长较慢等缺点。那么，研究人员在评估FBS的质量时，需要考虑哪些标准呢?

　　对于细胞培养而言，血清的重要性不言而喻。它含有蛋白、生长因子、氨基酸、脂类、碳水化合物、维生素及其他组分，可以促进贴壁或悬浮细胞的生长和维持。胎牛血清(FBS)是常用的血清添加剂，因为它富含生长因子、蛋白和大分子。尽管无血清和非动物来源的培养基也逐渐走红，但许多细胞系未必适用，并且存在费用较高和生长较慢等缺点。

　　胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分少。

　　胎牛血清要求：

　　1、性状、外观：浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。

　　2、蛋白质含量：3.5%~5.0%( w/v)

　　3、血红蛋白含量：≤ 0.02%( w/v)

　　4、无菌检验：阴性

　　5、支原体检验：阴性

　　6、细菌内毒素：≤5(EU/ml)

　　7、牛腹泻病毒：阴性

　　8、大肠杆菌噬菌体：阴性

　　9、支持细胞增殖：(Sp2/0-Ag14) 生长曲线 (接种浓度)大增殖浓度 ≥2.5×106个/ml，细胞倍增时间：≤15h，克隆率：≥85%

　　胎牛血清有什么用途

　　胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然，胎牛血清是品质高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分少。

　　新生牛血清应无细菌、支原体污染。血清中含有细菌会直接造成细胞污染、制品污染，因此无菌是基本的要求。另外细菌会产生内毒素，也称脂多糖。内毒素可以引起发热反应、白细胞反应、代谢性酸中毒、感染性休克、弥散性血管内凝血(DIC)。人及哺乳动物对内毒素异常敏感，疫苗中的内毒素含量高会引起人及动物的强烈反应，甚至被致死。所以生物制品及其原辅料对内毒素要求严格控制。按鲎试剂或内毒素检测仪操作程序测定，新生牛血清中的细菌内毒素含量应低于10EU/mL。

　　有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

　　是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

　　提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

　　起酸碱度缓冲液作用。

　　提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白mei失活，保护细胞不受伤害。

　　提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

　　细胞增殖高质量的血清含有丰富的细胞生长必需的营养成分，它提供细胞贴壁所需的因子，还起着缓冲酸碱度、提供解毒、保护细胞不受伤害等作用。用Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞进行细胞增殖试验测定标准血清(胎牛血清)的绝对克隆形成率和新生牛血清的相对克隆形成率，规定标准血清的绝对克隆形成率应不低于20%，胎牛血清的相对克隆形成率应不低于80%，新生牛血清的相对克隆形成率应不低于50%。

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