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人P 选择素(PS)酶联免疫分析试剂盒

阅读:111发布时间:2019-03-26

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人P 选择素(PS)酶联免疫分析试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10 孔,在*、第二孔中分别加标

准品 100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二

孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,

混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔

中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各

取 50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl,混

匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准

品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,

浓度分别为24ng/L,16ng/L ,8ng/L,4ng/L,  2ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样

品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样

品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混

匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3。

8. 洗涤:操作同 5。

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 人P 选择素(PS)酶联免疫分析试剂盒测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后 15分钟以内进行。


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