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小鼠促卵泡激素(FSH)ELISA试剂盒组成

阅读:94发布时间:2019-03-18

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小鼠促卵泡激素(FSH)ELISA试剂盒组成

130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶

2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(160U/mL)0.5ml×1瓶

3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶

4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份

5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张

6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

小鼠促卵泡激素(FSH)ELISA试剂盒操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

24 IU/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液

12 IU/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液

6 IU/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液

3 IU/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液

1.5 IU/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、

待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,

然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽

量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此

重复5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 小鼠促卵泡激素(FSH)ELISA试剂盒测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止

液后15 分钟以内进行。


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