*酶联免疫试剂盒检测步骤
准备：将要使用的酶标板条插入酶标板架上，并记录各标准品和样品的位置，为减小检测值波动建议做双孔平行实验(每个样本/标准品点两孔)，未使用的酶标板条用自封袋密封后，保存于2-8℃环境中以防变质；
加样：向对应微孔中加入标准品工作液/样品溶液50 μL，向每孔中加入50 μL酶标二抗工作液；再向每孔中加入50 μL抗体工作液；
孵育：轻轻振荡酶标板10 s，使孔内液体充分混匀后，盖好盖板膜于25℃避光反应20 min；洗涤：取出酶标板后小心揭开盖板膜，倒出板孔中液体后，在每孔加 250 μL洗涤工作液，浸泡15-30s后倒掉洗涤工作液，然后再加入洗涤工作液重复洗涤3~4次后，将酶标板倒置于吸水纸上，用力拍干；
显色：在每孔中加入100 μL 底物A和底物B的混合液(注：底物A液、底物B液必须按体积1:1充分混合，混合液在10 min内使用，切不可使用金属容器盛装、搅拌试剂以免底物变质失效)；
终止：在反应后的微孔中加入终止液50μL/孔，底物液由蓝变黄表明终止成功。
读数：终止后的酶标板应在5 min内用酶标仪读数，建议使用450 nm、630 nm双波长读取酶标板吸光度值。
*酶联免疫试剂盒利用*抗体与*可产生特异性结合的性质，先在酶标板上预包被抗原，再加入标准品(样本)和*抗体，样本或标准品中的*药物与固定在酶标板上的抗原竞争*抗体，加入底物催化显色。此时显色深度与标准品(样本)中*药物的含量成反比。
