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说起RNA甲基化，已知RNA存在超过100种修饰。在真核生物中，5’端的Cap以及3’的ployA修饰在转录调控中起到了十分重要的作用，而mRNA的内部修饰则用于维持mRNA的稳定性。mRNA最常见的内部修饰包括N6-腺苷酸甲基化（m6A）、N1-腺苷酸甲基化（m1A）、胞嘧啶羟基化（m5C）等。

什么叫m6A修饰？

如图所示，m6A就是在腺苷6位的N原子上插入一个甲基取代基。

m6A修饰又有什么样的功能呢？

更多功能，等待您的研究 ...

谁参与了m6A修饰？

m6A这种甲基化修饰被证明是可逆化的，包括甲基化转移酶（Writers）、去甲基化酶（Erasers）和甲基化阅读蛋白（Readers）等共同参与。其中甲基化转移酶包括METTL3/14、WTAP和KIAA1429等，主要作用就是催化mRNA上腺苷酸发生m6A修饰。而去甲基化酶包括FTO和ALKHB5等，作用是对已发生m6A修饰的碱基进行去甲基化修饰。阅读蛋白主要功能是识别发生m6A修饰的碱基，从而激活下游的调控通路如RNA降解、miRNA加工等。

1.m6A甲基化转移酶（Writers）

甲基化转移酶（methyltransferase）也叫Writers，是一类重要的催化酶，能够让mRNA上的碱基发生m6A甲基化修饰。METTL3、METTL14、WTAP和KIAA1492都属于m6A甲基化转移酶的核心蛋白。这些蛋白并不是各自孤立的，而是会形成复合物（complex）共同行使催化功能。由于酵母和线虫等生物缺少这四种核心蛋白中的一种或几种，所以m6A甲基化修饰属于高等真核生物du有的碱基修饰反应。

2.m6A去甲基化酶（Erasers）

在真核生物中，已发现的m6A去甲基化酶主要包括FTO和ALKBH5等。FTO蛋白全称Fat mass and obesity-associated protein，属于Alkb蛋白家族中的一员并且与肥胖相关，FTO被敲除或过表达都会显著改变小鼠的体重。ALKBH5是另一种重要的去甲基化酶，能够对细胞核中的mRNA进行去甲基化修饰，在N端有丙氨酸富集区和du有的卷曲螺旋结构（coiled-coil structure）。在细胞系中敲低ALKBH5后，mRNA上m6A修饰水平显著上升。

3.m6A甲基化阅读蛋白（Readers）

RNA pull-down实验已经鉴定了多种阅读蛋白，包括YTH结构域的蛋白、核不均一核糖蛋白（hnRNP）以及真核起始因子（eIF）等。YTHDF1-3主要在胞浆中特异性识别m6A修饰的mRNA，而YTHDC1-2的作用部位主要在细胞核内。eIF3蛋白能够与RNA 5’端UTR上发生m6A修饰的碱基相结合，从而促进mRNA的翻译。

m6A甲基化检测方法有哪些？

目前检测m6A所用的技术手段包括高通量测序、比色法以及液相色谱质谱联用（LC-MS）等。高通量测序偏向单碱基水平鉴定m6A；而比色法与LC-MS/MS比较相似，也是从整体水平上检测RNA上m6A甲基化水平，Epigentek公司推出的这款名为EpiQuik M6A RNA Methylation Quantification Kit试剂盒（P-9005），原理与ELISA反应类似，经过优化后检测m6A灵敏度会更高，操作更为简便。

您猜，植物中RNA是否也存着m6A修饰呢？

与哺乳动物一样，植物RNA也存在m6A修饰。大约在40年前，已经有国外的课题组shou次在小麦、燕麦、胚芽鞘和玉米的RNA中发现m6A修饰。植物也有属于自己的甲基化转移酶（writers）、去甲基化酶（erasers）和甲基化阅读蛋白（readers）。研究表明，m6A修饰被认为在植物胚胎发育中起着关键作用，同时，也参与调节对各种非生物（abiotic）和生物胁迫（biotic stress）的反应。

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