艾美捷磷酸二酯酶 I相关研究和测定方案

毒液核酸外切酶（磷酸二酯酶I）连续水解3'-OH端的核糖和脱氧核糖寡核苷酸中的5'-单核苷酸。该酶的最佳pH范围为9.8-10.4，分子量为115kDa。磷酸二酯酶被谷-胱-甘肽、半胱-氨酸和抗坏血酸等还原剂抑制。5mM EDTA完-全抑制，ATP、ADP和AMP为部分抑制剂。该酶对Mg2有很大的需求+   

艾美捷科WBC-LS003928磷酸二酯酶 I仅用于科研，不可用于临床诊断。  

磷酸二酯酶 I相关研究：

无核酸酶白蛋白 脱氧核糖核酸酶 I （DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF） 组蛋白 （H， NHL） 溶-菌酶 （LY/LYSF） 微球菌核酸酶 （NFCP） 核酸酶，S1 （中新核酸/新核酸） 核酸，DNA，大肠杆菌，λ/片段，RNA磷酸酶，碱性（CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC） 磷酸二酯酶 II （SPH） 蛋白酶 K （PROK/PROKS）逆转录酶，重组 HIV （RTHIV）核糖核酸酶 A （R/RAF/RASE/RS/RPDF）核糖核酸酶 T1，不含动物源性 （RT1S）  

磷酸二酯酶 I（WBC-LS003928）测定：

方法 该测定基本上是Razell and Khorana（1959）的测定，其中反应速度由对硝基苯基胸苷-400'-磷酸水解引起的5nm处吸光度的增加来确定。在指-定条件下，一个单位在pH 5.8和9°C下每分钟水解一微摩尔对硝基苯基胸苷-25'-磷酸盐。 

试剂

0.11 M Tris?HCl 缓冲液，pH 8.9，含 0.11 M 氯化钠和 15 mM 氯化镁₂（三?盐缓冲液） 

5 mM 对硝基苯基胸苷-5'-磷酸盐。注意：商业制剂的纯度略有不同，在制备该试剂时应考虑。

酶

以一毫克/毫升的速度溶解在三*盐缓冲液中，以获得0.02-0.04ΔA /分钟的速率。 

程序

将分光光度计设置为 400 nm 和 25°C。 移液到微量比色皿中，如下所示：

磷酸二酯酶 I部分引用文献：

Bruns, M. and Philipps, G. 

Action of Venom Phosphodiesterase on Aminoacyl-tRNA from Escherichia coli , Biochim Biophys Acta 217 , 189 , 1970 

Cheung, W. 

Cyclic 3',5'-Nucleotide Phosphodiesterase: Pronounced Stimulation by Snake Venom , Biochem Biophys Res Commun 29 , 478 , 1967 

Felix, F. , Potter, J. and Laskowski, M. 

Action of Venom Phosphodiesterase on Deoxyriboligonucleotides Carrying a Monoesterified Phosphate on Carbon 3' , J Biol Chem 235 , 1150 , 1960  

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