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艾美捷HRP标记亲和纯化山羊抗兔IgG(H+L)二抗参数介绍

时间:2023/5/4阅读:66
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HRP(Horseradish Peroxidase,辣根过氧化物酶)是一种分子量达44000的糖蛋白,由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成,通常来源于辣根植物中,是临床检验试剂中的常用酶。辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)比活性高,稳定,分子量小,纯酶容易制备,所以很常用。HRP广泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋 白,糖含量18%。由于其易于提取、价格相对低廉,同时性质稳定,耐热及有机溶剂的作用,与抗原或抗体偶联后,活性很少受损失,因此是迄今为止在免疫学中应用最为广泛的一种标记用酶。HRP的催化底物包括色原底物、化学发光底物等,其中常用的色原底物有邻苯二胺(OPD)、2,2’-吖嗪-(3-乙酰苯 基噻唑磺酸-6)(ABTS)、四甲基联苯胺(TMB)和4-氨基安-替-比-林:苯-酚耦联底物对等;而化学发光底物则包括Luminol/增强剂等系统。

 

基于免疫电泳和/或ELISA,抗体与全分子兔IgG反应。它还与其他兔免疫球蛋白的轻链发生反应。未检测到针对非免疫球蛋白血清蛋白的抗体。抗体可以与来自其他物种的免疫球蛋白发生交叉反应。

 

通过免疫亲和层析从抗血清中分离出完整的IgG抗体分子。它们具有通过二硫键连接在一起的Fc部分和两个抗原结合Fab部分,因此它们是二价的。据报道,平均分子量为约160kDa。整个IgG形式的抗体适用于大多数免疫检测程序,并且是极-具成本效益的。

 

艾美捷HRP标记亲和纯化山羊抗兔IgG(H+L)二抗#111-035-003基本参数:

应用类型:WB(1:10000 - 1:200000)、ELISA(1:5000 - 1:100000) IHC(1:500 - 1:5000)

免疫原:兔IgG

来源宿主:山羊

反应性:该山羊抗兔二抗与兔IgG分子有特异性反应,与其它兔免疫球蛋白(包括IgM、IgE、IgD、IgA等)的轻链有交叉反应。该二抗与血清内非免疫球蛋白无交叉反应,但可能与其它种属的免疫球蛋白有交叉反应。

保存建议:冻干粉保存在2-8°C,准备用时,根据指示的体积加入三蒸水,在2-8°C条件下,未稀释的液体保质期为6周,每天准备新鲜的工作液。如果溶解后想延长保存期,加入等体积的甘油(ACS级别或更好的)使终浓度为50%,保存在-20°C。另外也可以在没有甘油时直接分装,并冰冻在-70°C或以下,避免反复冻融。保质期为收到货物后至少1年,合适的保存方式可以延长保质期。

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辣根过氧化物酶

辣根过氧化物酶(HRP)缀合物通过改良的Nakane和Kawaoi程序制备(J.Histochem.Cytochem.1974。22, 1084). 过氧化物酶偶联物通常用于免疫组织化学、蛋白质印迹和ELISA。亲和纯化的抗辣根过氧化物酶和缀合物可用于辣根过氧化物蛋白酶抗原的检测或用于含HRP试剂的信号扩增。对于哺乳动物细胞的免疫染色,使用抗辣根过氧化物酶的优点是背景减少,因为抗体不识别在这些细胞中发现的内源性过氧化物酶样酶。


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