背景:
从凋亡到坏死的转变是一个定义松散的连续过程,需要认识到过程的各个阶段。磷脂酰丝-氨-酸(PS)在质膜细胞外表面的显示仍然是早期凋亡的统一标志。磷脂结合蛋白如膜联蛋白V在Ca2+存在下以高亲和力结合PS。鉴于膜联蛋白V不能渗透细胞,外化PS的结合对早期凋亡细胞具有选择性。类似地,如膜不可渗透的DNA嵌入染料标记细胞核的能力所证明的,质膜完整性的丧失是证明晚期凋亡和坏死的直接方法。考虑到膜联蛋白V通常与荧光(也称为FITC)结合,在绿色荧光蛋白(GFP)表达细胞中的凋亡检测可能是有问题的。这两个荧光团的发射曲线之间的光谱重叠使得信号之间的区分变得困难或不可能,从而损害了总体数据质量。
虽然可用于分析不表达任何荧光蛋白的细胞的凋亡和坏死,但GFP-CERTIFIED细胞凋亡/坏死检测系统专门设计用于表达GFP的细胞系和表达蓝色或青色荧光蛋白(BFP、CFP)的细胞。
此外,该试剂盒适用于活细胞或固定后细胞与探针(如标记抗体)或显示与荧光或香-豆-素类似光谱性质的其他荧光缀合物结合使用。该试剂盒包括测定细胞凋亡早期和晚期以及坏死的所有必要试剂。膜联蛋白V-EnzoGold(增强型菁-3)缀合物能够检测不同于荧光或GFP的细胞凋亡。坏死检测试剂(红色)类似于红色发光染料7-AAD,有助于晚期凋亡和坏死检测。该试剂盒还包括用作阳性对照的凋亡诱导剂(Staurosporin)。检测试剂可以单独使用或组合使用,分别用于单个或多个应用。该试剂盒还通过流式细胞术和荧光/共聚焦显微镜提供快速准确的结果。
艾美捷GFP-CERTIFIED细胞凋亡/坏死检测试剂盒:多重分析,区分健康、早期凋亡、晚期凋亡和坏死细胞,与GFP和其他绿色荧光探针兼容。
艾美捷GFP-CERTIFIED细胞凋亡/坏死检测试剂盒特点:
1、与GFP和其他绿色荧光探针的真正多路复用能力
2、易于区分健康、早期凋亡、晚期凋亡和坏死细胞
3、针对荧光显微镜和流式细胞术应用进行了优化
4、适用于死亡途径分析和药物/毒素研究
图1:GFP、膜联蛋白V-菁3缀合物和坏死检测试剂(红色)的激发(阴影)和发射(固体)光谱。所有三种染料都准备好用488nm激光源激发。所有荧光团的发射最大值彼此很好地分离。
艾美捷GFP-CERTIFIED细胞凋亡/坏死检测试剂盒相关文献:
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ALL blasts drive primary mesenchymal stromal cells to increase asparagine availability during asparaginase treatment: M. Chiu, et al.; Blood Adv. 5, 5164 (2021), Abstract;
Evofosfamide Is Effective against Pediatric Aggressive Glioma Cell Lines in Hypoxic Conditions and Potentiates the Effect of Cytotoxic Chemotherapy and Ionizing Radiations: Q. Bailleul, et al.; Cancer 13, 1804 (2021), Abstract; Full Text
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