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附文献丨艾美捷T7 RNA聚合酶说明书

时间:2022/11/10阅读:179
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艾美捷T7 RNA聚合酶化学性质

T7 RNA 聚合酶是一种依赖 DNA 的 RNA 聚合酶,其对噬菌体 T7 启动子序列有高特异性。该酶从 T7 启动子插入到转录载体下游的 DNA 上合成大量 RNA

 

应用:标记和未标记的 RNA 转录本的合成。

 

来源:从在质粒上表达 T7 RNA 聚合酶基因的大肠杆菌纯化获得。

 

性能和质量检验:3´ 和 5´ 脱氧核糖核酸外切酶、核糖核酸酶和 DNA 缺口检测;

转录反应中的性能。

 

单位定义:一个单位是指在1 hr 内、37°下,以 T7 转录载体作为模板,将 1 nmoL 核糖核苷酸水解为酸性可沉淀物质所需要的酶量。

 

单位反应条件:40 mM Tris-HCl (pH 8.0)25 mM NaCl8 mM MgCl22 mM 亚精胺-(HCl)35 mM DTT0.4 mM ATP0.4 mM CTP0.4 mM GTP0.4 mM UTP1µCi [3H]GTP1 µg SphI-cut pT7L13 和酶(50 µL10 min.37°下)。

 

638036943224962087527.jpg

 

艾美捷T7 RNA聚合酶内容与储存

T7 RNA 聚合酶配有一瓶 5X 反应缓冲液 [200 mM Tris-HClpH 值 8.0)、40 mM MgCl210 mM 亚精胺-(HCl)3125 mM NaCl] 和一瓶 100 mM DTT。保存于 -20°C

 

艾美捷T7 RNA聚合酶文献参考:

1Novel binding of HuR and poly(C)-binding protein to a conserved UC-rich motif within the 3'-untranslated region of the androgen receptor messenger RNA.

Yeap Bu B; Voon Dominic C; Vivian Julian P; McCulloch Ross K; Thomson Andrew M; Giles Keith M; Czyzyk-Krzeska Maria F; Furneaux Henry; Wilce Matthew C J; Wilce Jackie A; Leedman Peter J;

J Biol Chem (2002) 277:27183-27275

2Principles of 3' splice site selection and alternative splicing for an unusual group II intron from Bacillus anthracis.

Robart AR, Montgomery NK, Smith KL, Zimmerly S,

RNA (2004) 10:854-862


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