弹性蛋白酶,由动物的胰脏用水提取而得,也可用细菌的培养液在低温下用水提取而得。
弹性蛋白酶的用途:
在医学临床主要用于治疗高血脂症,防止动脉粥样硬化、脂肪肝。也可用于肉类和水产加工中的嫩化。
弹性蛋白酶的化学性质:
1.其外观呈淡黄色至深黄色粉末,也可是浅褐至深褐色液体。可溶于水,不溶于乙醇,有吸湿性。
2.纯胰弹性蛋白酶,由240个氨基酸残基组成的单一肽链,相对分子质量约为25000,等电点为9.5。
3.弹性蛋白酶 可使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白消化分解,包括肽键结合的、酰胺结合的和酯结合的进行加水分解。作用的最适pH值7.8,最适作用温度25℃。
4.弹性蛋白酶 具有明显的β-脂蛋白酶作用,能活化磷酯酶A,降低血清胆丨固醇,改善血清脂质,降低血浆胆丨固醇及低密度脂蛋白、甘油三酯,升高高密度脂蛋白、阻止脂质向动脉壁沉积和增大动脉的弹性,具有抗动脉粥样硬化及抗脂肪肝作用。
5.弹性蛋白酶最初以酶原的形式存在,经过酶切后才有活性。
Worthington公司弹性蛋白酶特异性:
猪弹性蛋白酶 I 对 Ala-Ala 和 Ala-Gly 键具有特异性,而弹性蛋白酶 II 对 P1 位具有中等至大疏水性氨基酸的底物具有广泛的特异性(Gertler等人1977、Del Mar等人1980 和Gestin等人,1997)。猪弹性蛋白酶是有效的弹性蛋白酶,其速率是人类白细胞弹性蛋白酶的 20 倍(Bieth 1978、Bieth 1986 和 Largman 1983)。
水解发生在几个步骤中。弹性蛋白酶与其底物之间形成吸附复合物,然后进行亲核攻击(S214)以形成酰基酶中间体,并释放个产物(底物的C末端)。中间体在脱酰基步骤中水解,再生活性酶并释放第二个产物 (Bieth 1986)。
Worthington公司弹性蛋白酶分子特征:
猪胰弹性蛋白酶由 240 个氨基酸的单肽链组成,并含有 4 个二硫键 (Sawyer et al . 1973)。它与来自其他物种的胰腺弹性蛋白酶具有高度的序列同一性,例如与其共享 86% 同一性的大鼠(MacDonald等人,1982)。弹性蛋白酶 I 和 II 基因具有序列相似性,尤其是在 5' 近端侧翼区域,包括 TATA 盒和推定的组织特异性增强子序列(Ornitz等人1985、Stevenson等人1986、Swift等人1984, Tani等人1987 和 Gestin等人1997)。
Worthington公司弹性蛋白酶的应用:
1.组织解离:因为弹性蛋白在结缔组织的弹性纤维中的浓度最高,所以经常使用弹性蛋白酶解离含有广泛细胞间纤维网络的组织。为此,它通常与其他酶一起使用,例如胶原酶。
2.膜蛋白溶解
3.蛋白质序列研究
Worthington公司专注于生物技术和生命科学研究,诊断,生物制药和生物加工应用的高质量纯化酶,蛋白质,核酸和试剂盒。艾美捷科技是Worthington公司的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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