胶原是细胞外基质的重要组分之一，胶原水平的过高或过低都会导致疾病。例如：胶原过多会导致组织纤维化，过少会导致骨关节炎。因此在许多疾病研究中检测胶原水平非常重要。
艾美捷 Biovision总胶原蛋白检测试剂盒(比色法)基于样品中胶原蛋白酸水解产生水解产物和羟脯氨酸，羟脯氨酸被进一步氧化代谢产生有色产物，于560 nm处有吸收峰.
该胶原蛋白检测试剂盒组分：
1、96孔平底透明板
2、多阱分光光度计
3、12 M盐酸(浓盐酸)
4、水解：聚丙烯小瓶(BV类别号M1352)和螺帽
艾美捷 Biovision胶原蛋白检测试剂盒检测方案：
1.样品制备：组织或蛋白质/肽样品：组织样品(即肺)应在ddH2O中均匀化，使用100µl每10 mg组织使用ddH2O。向100µl样品匀浆中添加100µl浓HCl(~12 M，未提供)，并将其放入一个压力合适的聚丙烯螺旋小瓶中。在120°C下水解样品3小时(见注释C)。尿液：用等量水水解样品压力密封聚丙烯螺旋盖小瓶中12m浓HCl(即100µl尿液+100µl HCl)的体积。之后均质，通过添加4 mg活性炭，用活性炭澄清样品。以10000 x g的速度旋转并离心3小时至少清除沉淀和活性炭。如果需要，重复上述步骤。将2-30µl各水解样品转移至96孔板中，并通过在热板/干热块或微孔板培养箱上70°C加热板蒸发至干燥。
注意：
A.对于未知样品，建议进行初步试验，以确保读数在标准曲线范围内，并且相应地调整样品水解液的体积(可使用2-30µl水解液)或在必要时稀释水解液。
B对于胶原蛋白浓度J低的样品，建议平行运行两个测试样品井，并加一个使用已知量的I型胶原蛋白标准品(4.0µg)，以确保准确测定。
C对于样品水解，带有紧配合螺旋盖(无O形圈)的聚丙烯小瓶产生zui佳结果。推荐Biovision的聚丙烯瓶和盖(类别号M1353和M1352)。
图：(a)水解胶原蛋白I标准曲线(0-10µg)。(b) 大鼠组织中总胶原浓度的估算。鼠肾，肝、肺和肌肉样品用ddH2O均质，并在120°C下用12 M HCl水解3小时。沉淀被分离通过离心(10000 x g，持续3分钟)去除。根据试剂盒测定30微升水解样品协议。胶原含量(mg胶原/g湿组织)：肾脏：2.01±0.22；肝脏：0.71±0.32；肺：3.03±0.3；肌肉：3.25±0.98。
