羟脯氨酸((2S,4R)-4-羟脯氨酸,Hyp)是由脯氨酰-4-羟化酶形成的非蛋白源性氨基酸,它催化蛋白质合成后多肽脯氨酸残基的翻译后修饰。在动物体内,羟脯氨酸几乎全部存在于胶原蛋白中,胶原蛋白中羟脯氨酸的质量含量约为12-14%(纤维状弹性蛋白也含有少量羟脯氨酸)。因此,组织水解物中的羟脯氨酸可直接测量胶原蛋白的含量。
胶原蛋白是哺乳动物中含量zui丰富的蛋白质,许多疾病被认为会影响胶原蛋白的转化,包括肿瘤侵袭和转移、类风湿性关节炎、心肺纤维化和肌营养不良。Hyp的经典测定方法是将Hyp氧化成吡咯中间体,然后与溶解在浓高氯酸(HClO4)中的埃利希试剂反应。高氯酸是一种有毒和高活性的有害物质,需要特殊的处理和废物处理协议。
艾美捷 BioVision 羟脯氨酸检测试剂盒II(不含高氯酸盐)使用专有的酸性显影液较精确测量组织和蛋白质/肽酶水解物中的Hyp,而无需使用危险的高氯酸盐。这是一个快速方便的方案,产生了一个颜色鲜艳的发色团,吸收峰在560nm处。该分析可检测96孔格式的每孔至少0.05µg羟脯氨酸,并产生几乎与经典高氯酸法相同的比色结果。
艾美捷 Biovision 羟脯氨酸检测试剂盒主要特点:
1.非放射性、均质分析;
2.特异性分析;
3.方便:较少的样品制备;快速操作protocols;
4.经济高效:50/100次分析;兼容高通量筛选;
5.经过验证的:使用哺乳动物组织、生物体液等。