今天我们就主要来聊一聊小G蛋白活性增强剂——鸟苷酸交换因子(GEF)，GEF 是通过催化其目标 GTPase上的核苷酸交换来发挥作用，GEF与核苷酸结合的 GTPase 结合，这会导致结合的核苷酸被释放，从而产生不含核苷酸的GEF-GTPase 反应中间体。这种不含核苷酸的复合物随后将结合新的核苷酸，然后GEF再从GTPase 中释放出来。
由于GEFs对GDP-GTPases的亲和力高于对相应GTP-GTPases的亲和力，在正常细胞中GTP和GDP比率约为10:1，GEFs将推动从GDP-GTPases到GTP-GTPases的转换。
艾美捷GEF活性检测试剂盒是一款基于荧光法的检测GTP酶上的核苷酸转换的试剂盒，可适用于常规的96孔格式或高通量384孔格式。
GEF活性检测试剂盒包含检测所需的所有试剂：
1.Exchange Buffer
2.His标签 Cdc42蛋白
3.His标签 Rac1 蛋白
4.His标签 RhoA 蛋白
5.His标签 hDbs 蛋白(作为 Cdc42 和 RhoA 的GEF的阳性对照 )
6.黑色384孔板
7.黑色96孔板
检测原理：该试剂盒是通过检测荧光核苷酸类似物 N-甲基邻氨基苯甲酰-GTP(mant-GTP)对 GTPase 的结合情况来检测GEF的活性的。一旦mant-GTP与 GTPase 结合， mant-GTP的荧光强度(Ex：360 nm，Em：440 nm)显著增加，通过检测游离的mant-GTP和GTPase 结合的 mant-GTP 之间的荧光值差异，即可检测样本中GEF的活性。
GEF活性检测试剂盒的主要用途和应用:
1.测定未知GEFs活性；
2.小GTPases及其相关GEFs的生化特性表征；
3.研究不同辅助因子或蛋白结构域对GEF活性的调控；
4.筛选GEFs或GTPases突变蛋白的活性和底物特异性；
5.HTS(高通量筛选)筛选鉴定GEF抑制剂。
检测结果展示：
图 1. 96 孔板中Dbs 对于Cdc42、RhoA 和 Rac1 的交换活性
图 2.384 孔板中Dbs 对于Cdc42、RhoA 和 Rac1 的交换活性
Cytoskeleton专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰(PTM)、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品，尤其以细胞骨架相关研究见长，既能满足于样品较少的科学研究，也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。艾美捷科技是Cytoskeleton的中国代理商，为您提供优质的GEF活性检测试剂盒。
