蛋白酶A(Protease A)ELISA试剂盒的详细资料：

英文名称：Protease A (Protease A) ELISA kit

货号：KS18394

规格：96T/48T

使用范围：仅限科研范围内使用

各种种属：人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、牛、羊… 
标本齐全：血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液、关节液、胸腔yi液等… 
保存条件：2-8℃ 
实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人肌酸激酶脑型同工酶（CK-BB）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肌酸激酶脑型同工酶（CK-BB）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

蛋白酶A(Protease A)ELISA试剂盒样本处理及要求

1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

蛋白酶A(Protease A)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

试剂准备

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

蛋白酶A(Protease A)ELISA试剂盒操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

蛋白酶A(Protease A)ELISA试剂盒注意事项

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

蛋白酶A(Protease A)ELISA试剂盒洗板方法

手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

蛋白酶A(Protease A)ELISA试剂盒相关优质产品：

KS17527    绵羊卵泡刺激素(FSH)ELISA试剂盒
KS17528    绵羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒
KS17529    绵羊粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)ELISA试剂盒
KS17530    绵羊巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)ELISA试剂盒
KS17531    绵羊结合珠蛋白/触珠蛋白(HP)ELISA试剂盒
KS17532    绵羊窖蛋白Caveolin1(CAV1)ELISA试剂盒
KS17533    绵羊甲状腺素(T4)ELISA试剂盒
KS17534    绵羊基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP9/GelatinaseB)ELISA试剂盒
KS17535    绵羊基质金属蛋白酶3(MMP3)ELISA试剂盒
KS17536    绵羊基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP2/GelatinaseA)ELISA试剂盒
KS17537    绵羊基质金属蛋白酶1(MMP1)ELISA试剂盒
KS17538    绵羊饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒
KS17539    绵羊黄体生成素(LH)ELISA试剂盒
KS17540    绵羊*(cAMP)ELISA试剂盒
KS17541    绵羊环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒
KS17542    绵羊花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒
KS17543    绵羊骨钙素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒
KS17544    绵羊甘油醛3磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒
KS17545    绵羊肺表面活性物质相关蛋白C(SPC)ELISA试剂盒
KS17546    绵羊肺表面活性物质相关蛋白B(SPB)ELISA试剂盒
KS17547    绵羊非酯化脂肪酸(NEFA)ELISA试剂盒
KS17548    绵羊二醇受体(ERAlpha)ELISA试剂盒
KS17549    绵羊催产素(OT)ELISA试剂盒
KS17550    绵羊雌二醇(E2)ELISA试剂盒
KS17551    绵羊成纤维细胞生长因子23(FGF23)ELISA试剂盒
KS17552    绵羊补体片段3a(C3a)ELISA试剂盒
KS17553    绵羊白介素8(IL8/CXCL8)ELISA试剂盒
KS17554    绵羊白介素4(IL4)ELISA试剂盒
KS17555    绵羊白介素1α(IL1α)ELISA试剂盒
KS17556    绵羊白介素13(IL13)ELISA试剂盒
KS17557    绵羊白介素12(IL12)ELISA试剂盒
KS17558    绵羊白介素10(IL10)ELISA试剂盒
KS17559    绵羊白蛋白(Albumin)ELISA试剂盒
KS17560    绵羊γ干扰素(IFNγ)ELISA试剂盒
KS17561    绵羊C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒
KS17562    绵羊Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒