【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
1.产品名称：兔肌腱干细胞操作步骤
2.组织来源：肌腱组织
3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介：
兔肌腱干细胞分离自肌腱组织；肌腱是肌腹两端的索状或膜状致密结缔组织，便于肌肉附着和固定。一块肌肉的肌腱分附在两块或两块以上的不同骨上，是由于肌腱的牵引作用才能使肌肉的收缩带动不同骨的运动。每一块骨骼肌都分成肌腹和肌腱两部分，肌腹由肌纤维构成，色红质软，有收缩能力，肌腱由致密结缔组织构成，色乳白较硬，没有收缩能力。肌腱把骨骼肌附着于骨骼。长肌的肌腱多呈圆索状，阔肌的肌腱阔而薄，呈膜状，又叫腱膜。此处的肌腹即为通常所说的红肌，而肌腱即为白肌，分别控制肌肉的力量、爆发力和耐力。肌腱干细胞（TSCs）是一种来源于肌腱组织的间充质干细胞，其具有多向分化潜能，并且在外源性前列腺素E2作用下异常分化。体外培养时该细胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潜能等干细胞的普遍特性。肌腱干细胞可以被诱导向脂肪细胞、软骨样细胞、骨细胞分化；在裸鼠模型中，肌腱干细胞还可以形成肌腱样组织，软骨样组织以及腱-骨连接样组织等。相比骨髓间充质干细胞而言，TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力，软骨相关基因和肌腱相关基因表达更高，具有更好的成骨、成脂和成软骨能力，因此可以作为组织工程中的种子细胞。
本公司的兔肌腱干细胞采用胶原酶、*混合消化法并通过肌腱干细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经CD90/CD44、CD34/CD45免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息：
DMEM-F12、FBS、Penicillin、Streptomycin等
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
Cy3标记的兔抗羊IgM Inhibin Alpha
Cy5标记的兔抗羊IgM Inhibin beta A peptide
Cy5.5标记的兔抗羊IgM Inhibin beta B
Cy7标记的兔抗羊IgM Integrin Alpha3
PE标记的兔抗羊IgM Integrin Beta5
*标记的兔抗羊IgM Integrin alpha 1
辣根过氧化物酶标记的兔抗羊IgM Integrin Alpha4 Beta7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Integrin alpha4,beta7)
辣根过氧化物酶标记的兔抗豚鼠IgG Integrin AlphaE2/CD103
胶体金标记的兔抗豚鼠IgG ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3)
*标记的兔抗豚鼠IgG IQGAP1
Cy3标记的兔抗豚鼠IgG IRF-1(Interferon regulatory factor-1)
Cy5标记的兔抗豚鼠IgG IRAK 2
Cy5.5标记的兔抗豚鼠IgG IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide
Cy7标记的兔抗豚鼠IgG Integrin a7(integrin alpha 7)
PE标记的兔抗豚鼠IgG integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29)
PE-Cy3标记的兔抗豚鼠IgG Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e)
PE-CY5标记的兔抗豚鼠IgG Integrin alpha V/CD51 peptide
APC标记的兔抗豚鼠IgG JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1)
Alexa Fluor 350标记的兔抗豚鼠IgG JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2)
Alexa Fluor 488标记的兔抗豚鼠IgG phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008)
碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗豚鼠IgG JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3)
FITC标记的兔抗豚鼠IgG phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide
Alexa Fluor 555标记的兔抗豚鼠IgG Ki-67(Antigen identified by monoclonal antibody Ki
REG-4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit 人再生基因蛋白IV 48T
VS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit 人多功能蛋白聚糖 48T
Nfkbie(Human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon) KLISA Kit 人B细胞κ 轻肽基因增强子核因子抑制因子ε 48T
ADAMTS4(Human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4) ELISA Kit 人ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4 48T
Human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 48T
PAQR7(Human progestin and adipoQ receptor family member VII ) ELISA Kit 人孕酮和adipoQ受体家族成员Ⅶ 48T
COLEC11(Human collectin sub-family member 11) ELISA Kit 人集蛋白亚家族成员11 48T
Serpina3g(Human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G) ELISA Kit 人*蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G 48T
Human similar to RIKEN cDNA A630077B13 gene ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA A630077B13 基因 48T
Human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA 3110050K21 基因 48T
Human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA 2610307008 基因 48T
human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA KIT 人类似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 48T
RHOB(Human ras homolog gene family,memmber B) ELISA Kit 人ras同源物基因家族成员b 48T
