1.产品名称：猪前脂肪细胞实验方法
2.组织来源：脂肪组织
3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介：
猪前脂肪细胞分离自脂肪组织；脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成，聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶；贮存的脂肪，在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸，液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应，参与多种重要病理生理过程；脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织在体内含有两种主要的细胞：一种是在胞浆内积聚脂滴的成熟脂肪细胞；另一种是虽未在胞浆内积聚脂滴但有这种潜能的前脂肪细胞。前脂肪细胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪细胞呈圆形，已经失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化前体细胞，与肥胖有着非常密切的关系。前脂肪细胞是一种类成纤维细胞，在演变的过程中不断吸收脂质，zui终成为成熟的脂肪细胞。前脂肪细胞对外界机械损伤的抵抗力较强，可望成为软组织缺损的有益填充物。
本公司的猪前脂肪细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经油红O染色鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息：
DMEM-F12、FBS、Penicillin、Streptomycin等
优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
PE-CY5标记的兔抗猴IgG OXR (Orexin receptor)
APC标记的兔抗猴IgG P2P-R/RBBP6(proliferation potential protein related)
Alexa Fluor 350标记的兔抗猴IgG P19ARF
Alexa Fluor 488标记的兔抗猴IgG phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide
Alexa Fluor 555标记的兔抗猴IgG MKK3(MAP Kinase Kinase 3)
PE-Cy5.5标记的兔抗猴IgM P53(wt-p53)
PE-Cy7标记的兔抗猴IgM Mtp53(Mutant type p53)
Cy3标记的兔抗猴IgM WIG-1(wtp53-induced gene 1)
Cy5标记的兔抗猴IgM P73 protein
Cy5.5标记的兔抗猴IgM p70 S6 Kinase/P70 Beta1
Cy7标记的兔抗猴IgM PALB2(partner and locaizer of BRCA2)
PE标记的兔抗猴IgM PAFR/PTAFR
APC标记的兔抗猴IgM Phospho-PAK4 (Ser99) peptide
Alexa Fluor 350标记的兔抗猴IgM PAK7/PAK5/MBT
Alexa Fluor 488标记的兔抗猴IgM PAR-1 (Protease-activated receptors-1)
Alexa Fluor 555标记的兔抗猴IgM PAR-2 (Protease-activated receptors-2)
*标记的兔抗猴IgM PAR4 (protease-activated receptor 4)
碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗猴IgM PARP(poly ADP-ribose polymerase)N-Terminus
胶体金标记的兔抗猴IgM PAX8(Paired box gene 8)
辣根过氧化物酶标记的兔抗猴IgM PAX9(Paired box gene 9)
FITC标记的兔抗猴IgM P-cadherin(placental)
罗丹明标记的兔抗猴IgM LI-cadherin(liver-intestine cadherin)
罗丹明标记的兔抗小鼠IgG PDCD4(programmed cell death 4)
MYOG(Human myogenin) ELISA Kit 人肌细胞生成素 48T
ASP(Human antibody to group A streptococcal polysaccharide) ELISA Kit 人A组链球菌菌壁多糖抗体 48T
APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit 人活化蛋白C抵抗素 48T
Ext-N(Human N-terminal extein) ELISA Kit 人N端外显肽 48T
SC(Human secretory component) ELISA Kit 人分泌成分 48T
ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit 人二磷酸腺苷 48T
PG(Human Proteoglycan) ELISA Kit 人蛋白聚糖 48T
PYD(Human Pyridinoline) ELISA Kit 人吡啶酚 48T
5-HIAA(Human 5-hydroxyindolacetic acid) ELISA Kit 人5羟基吲哚乙酸 48T
12-HETE(Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid) ELISA Kit 人12羟二十烷四烯酸 48T
Hyp(Human hydroxyproline) ELISA Kit 人羟* 48T
NO(Human nitric oxide) ELISA Kit 人一氧化氮 48T
ENA-78/CXCL5(Human Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit 人上皮中性粒细胞活化肽78 48T
VC(Human Vitamin C) ELISA Kit 人* 48T
VB6(Human Vitamin B6) ELISA Kit 人*6 48T
sP-selectin(Human soluble P-selectin) ELISA Kit 人可溶性P选择素 48T
TIMP-1(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶抑制因子1 48T
VD(Human Vitamin D) ELISA Kit 人* 48T
