1.产品名称：小鼠视网膜神经节细胞实验方法
2.组织来源：视网膜组织
3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介：
小鼠视网膜神经节细胞分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。*神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处zui多。第二层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力zui强。视网膜神经节细胞贴壁后呈单层排列，部分细胞聚集成团，细胞呈圆形或椭圆形，核圆且相对透明，有些细胞膜上伸出短而小的突起；该细胞为高度分化细胞，在体外属于不增殖群。视网膜神经节细胞是青光眼病理性损害的主要细胞，视网膜神经节细胞的死亡可导致视功能不可逆损伤，研究视网膜神经节细胞损害的细胞学和分子生物学机制有利于青光眼发病机制的研究。
本公司的小鼠视网膜神经节细胞采用*-胶原酶联合消化法，结合视网膜神经节细胞培养基培养和化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经CD90、MAP-2免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息：
Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
大鼠抗核膜糖蛋白210抗体
小鼠肾上腺髓质素
大鼠可溶性Toll样受体6
人血管内皮细胞生长因子D
人血管内皮细胞生长因子C
大鼠可溶性Toll样受体2
小鼠可溶性瘦素受体
人血管内皮细胞生长因子B
大鼠前列腺素F2α
小鼠β内啡肽受体
人血管内皮细胞生长因子
大鼠白三烯E4
小鼠肝脂酶
大鼠*
人血管内皮细胞粘附分子1
小鼠乙型肝炎核心抗体
小鼠乙型肝炎e抗体
大鼠*Ⅻ
人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4
小鼠乙型肝炎e抗原
大鼠*ⅩⅢ
大鼠*Ⅲ
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3
小鼠乙型肝炎表面抗体
小鼠二胺氧化酶
大鼠载脂蛋白H
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1
人肿瘤坏死因子β
小鼠乙型肝炎表面抗原
大鼠白介素2受体
人可溶性Endoglin
人肿瘤坏死因子α
大鼠肾上腺髓质素
人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ
大鼠β内啡肽受体
小鼠活化蛋白C
TRAb(Mouse thyroid stimulating hormone receptor antidoby)ELISA Kit 小鼠抗促甲状腺素受体抗体 48T
CA(Mouse catecholamine)ELISA Kit 小鼠儿茶酚胺 48T
IL-27(Mouse Interleukin 27)ELISA Kit 小鼠白介素27 48T
IL-23(Mouse Interleukin 23)ELISA Kit 小鼠白介素23 48T
CT-1(Mouse cardiotrophln 1)ELISA Kit 小鼠心肌营养素1 48T
Alpha-Fodrin IgG/IgA(Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA)ELISA Kit 小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA 48T
AT- III (Mouse Anti-Thrombin III )ELISA Kit 小鼠抗*Ⅲ抗体 48T
NP-Y(Mouse neuropeptide Y) ELISA Kit 小鼠神经肽Y 48T
GHRP(Mouse Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit 小鼠生长激素释放多肽 48T
Gelsolin(Mouse Gelsolin ) ELISA Kit 小鼠凝溶胶蛋白 48T
RANKL(Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit 小鼠核因子κB受体活化因子配基 48T
TpP(Mouse thrombus precursor protein) ELISA Kit 小鼠血栓前体蛋白 48T
GnRH(Mouse gonadotropin-releasing hormone) ELISA Kit 小鼠*释放激素 48T
INH-BGnRH(Mouse inhibin B) ELISA Kit 小鼠抑制素B 48T
TRH(Mouse thyrotropin-releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促甲状腺素释放激素 48T
CRH(Mouse corticotropin releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促肾上皮质激素释放激素 48T
ISR- Beta(Mouse Insulin Receptor Beta) ELISA Kit 小鼠胰岛素受体β 48T
