1.产品名称：小鼠肾小管上皮细胞实验方法
2.组织来源：肾组织
3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介：
小鼠肾小管上皮细胞分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、*等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性*3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小管是机体肾脏器官上与肾小囊壁层相连的一条细长上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。肾小管按不同的形态结构、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和远端小管三部分；近端小管可分为直部和曲部，曲部也称为近曲小管，位于皮质迷路内，于肾小体附近高度蟠曲；远端小管曲部也称为远曲小管，位于皮质迷路内。肾小管上皮细胞是肾小管外面的一层细胞，肾小管上皮细胞的分离、培养是研究肾脏疾病的一项重要技术，目前该细胞分离方法有酶分离法、化学分离法筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法等。肾小管上皮细胞主要功能：①肾小管上皮细胞重吸收原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非营养物质进入终尿；③细胞能分泌炎症介质如细胞因子和趋化因子，通过产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反应；④移植肾炎症和新月体肾炎中PTEpiC表达IL-2R和MHC-Ⅱ类抗原，这说明肾小管上皮细胞参与肾免疫损伤的发生。随着对肾间质纤维化机制研究的日渐加深，肾小管上皮细胞（RTECs）在其中的作用日益被人们重视。因此，提供良好的肾小管上皮细胞模型，在肾小管间质疾病的发病机制和治疗药物筛选的研究中是非常重要的。
本公司的小鼠肾小管上皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小管、后用胶原酶消化，结合上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经Cytokeratin-18/PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息：
M199、FBS、上皮细胞生长添加剂、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
人α半乳糖基抗体
人αN已酰氨基葡糖苷酶
人α2纤溶酶抑制物
人高香草酸
人*腺嘌呤二核苷酸磷酸
人钙粘蛋白相关的神经受体1
人毛细血管扩张性共济失调突变基因
人芳香烃受体
人特异性巨噬细胞武装因子
人促有丝分裂因子
人转录因子抗体-1
人抗鼠抗体
人钙离子通道抗体
人溴脱氧核苷*
人纤维母细胞表面抗原
人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子
人阿黑皮素原
人不对称二甲基*
人血清素/血清胺
人细胞毒素
人α突触核蛋白
人糖链抗原19-9
人水蛭素
人*
人上皮特异性抗原
人上皮膜抗原
人凝聚素
人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体
人抗着丝点抗体
人肌细胞生成素
人A组链球菌菌壁多糖抗体
人活化蛋白C抵抗素
人N端外显肽
人分泌成分
人二磷酸腺苷
人蛋白聚糖
人吡啶酚
人5羟基吲哚乙酸
人12羟二十烷四烯酸
人羟*
人一氧化氮
人上皮中性粒细胞活化肽78
人*
人*6
人可溶性P选择素
人基质金属蛋白酶抑制因子1
人*
人*1
人*12
protein-2)/FITC 荧光素标记抗二氢嘧啶酶样2抗体IgG 0.2ml
Anti-Phospho-CRMP-2 (Thr514) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化二氢嘧啶酶样2抗体IgG 0.2ml
Anti-CRP/Biotin *化C-反应蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-CRP/FITC 荧光素标记C-反应蛋白抗体IgG 0.2ml
Anti-CRP/HRP 辣根过氧化物酶标记鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体IgG 0.2ml
Anti-CRTAM/FITC 荧光素标记CRTAM抗体IgG 0.2ml
Anti-C-SKI/FITC 荧光素标记抗C-SKI抗体IgG 0.2ml
Anti-CSIG/FITC 荧光素标记细胞衰老抑制基因抗体IgG 0.2ml
Anti-CSP/FITC 荧光素标记环子孢子蛋白(约氏疟原虫)抗体IgG 0.2ml
Anti-CT/FITC 荧光素标记降钙素抗体IgG 0.2ml
Anti-CT-1/CTF1/FITC 荧光素标记心肌营养素1抗体IgG 0.2ml
Anti-CT-R/FITC 荧光素标记降钙素受体抗体IgG 0.2ml
Anti-CSMD1/FITC 荧光素标记抑癌基因CSMD1抗体IgG 0.2ml
Anti-CTBP1/FITC 荧光素标记C端结合蛋白1抗体IgG 0.2ml
Anti-CT DNA /FITC 荧光素标记兔抗小牛胸腺DNA 抗体IgG 0.2ml
Anti-CT DNA /Gold 胶体金标记兔抗小牛胸腺DNA 抗体IgG(10nm/15nm) 0.2ml
Anti-CTGF/FITC 荧光素标记结缔组织生长因子抗体IgG 0.2ml
Anti-CTLA-4/CD152 /FITC 荧光素标记淋巴细胞相关抗原4/细胞毒性T细胞抗原-4抗体IgG 0.2ml
