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上海邦景实业有限公司
小鼠胚胎成纤维细胞;PA317操作步骤售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠胚胎成纤维细胞;PA317操作步骤
形态特性 成纤维细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 PA317细胞株源自TK- NIH/3T3细胞,通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。 通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞,结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。 这株细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类。 可能因为用于构建这株细胞而转入的DNA丢失,能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。 在包含0.03 mM 次黄嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培养基中短暂(大
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞名称 | 小鼠胚胎成纤维细胞;PA317操作步骤 |
生长特性 | 贴壁生长 |
价格 | 来电可享受优惠 |
冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
优势:
1、细胞株种类齐全,包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株,如:人滑膜细胞,人胃癌细胞,人细胞,人肾近曲小管上皮细胞,肝癌细胞,心肌细胞,子宫内膜细胞等
2、*,专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株,免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片,三天回传细胞生长状态图片,五天内有问题公司负责重发,超过五天时限至一个月内重发细胞收半价,超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠,完善、稳定的实验体系,优秀的科研队伍,*的实验设备、准确可靠的实验结果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
2法)
*激酶2(Tyk2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
细胞附着蛋白4(CYTH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
干扰素调节因子5(IRF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
细胞附着蛋白相互作用蛋白(CYTIP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
B-细胞连接蛋白(BLNK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
B-淋巴细胞趋化因子1(BLC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
生长调节致癌基因β(GROβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
生长调节致癌基因γ(GROγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ3(PLCβ3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
糖磷脂酰肌醇(GPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
胸肾表达趋化因子(BRAK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
皮肤T-细胞虏获趋化因子(CTACK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
D-二聚体(D2D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
抑制素βC(INHβC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Endoglin蛋白(ENG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
肝脂酶(LIPC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
肝脂酶(LIPC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
肝脂酶(LIPC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1) p53凋亡刺激蛋白1抗原 CD45/B220 白细胞共同抗原抗体 0.5mg
ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原 AFP 甲胎蛋白AFP抗体 0.5mg
neurofasciu-155 神经束蛋白-155 CD83 CD83抗体 0.5mg
NGF- Beta 神经生长因子-β(多肽片断抗原) CD73/NT5 CD73抗体 0.5mg
Ang I/AT1(Angiotensin I) 血管紧张素I抗原 MAL/MPV17 T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体 0.5mg
NGF-R(p75NTR) 神经生长因子受体(抗原) CXC-R2 CXCR2/CD182 0.5mg
AT1R(Angiotensin II Type 1 Receptor) 血管紧张素Ⅱ-1型受体抗原 HE4 附睾分泌蛋白4抗体 0.5mg
AT1R/AGTR1(Angiotensin II Type 1 Receptor) 血管紧张素Ⅱ-1型受体抗原 nonstructural protein 1/NS1 A型流感病毒-NS1抗体(神经氨酸酶1) 0.5mg
NIK,NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB诱导的激酶(抗原) Factor VII *7抗体 0.5mg
ATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化复制因子1 phospho-ITGB4(Tyr1530) 磷酸化整合素β4抗体 0.5mg
NKB (Neurokinins B) 神经激肽B(抗原) phospho-RUNX3(Ser338) 磷酸化Runx3抗体 0.5mg
ATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化复制因子2(多肽) GLUT2 葡萄糖转运蛋白2 0.5mg
phospho-ATF2(pSer490/pSer498) 磷酸化活化复制因子2抗原 Collagen II/Chondrocalcin Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体 0.5mg
NKR ; Neurokin B receptor (Neuromedin K receptor; NK-4 receptor) 神经激肽-B受体(抗原) Collagen II/Chondrocalcin Ⅱ型胶原α1
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