【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠胚胎成纤维细胞；MEF操作步骤
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 取孕9天的615小鼠胚胎，去除脑、心脏等培养建立。该细胞可用作饲养层细胞，支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时，MEF需经丝裂霉素C处理停止生长。建议作为ES细胞的饲养层时，MEF不要超过6代。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%CS
传代方法 1:3传代；3~4天1次。
传代情况 P1
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
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6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
N-乙酰转移酶1(NAT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
氯离子通道辅助蛋白1(CLCA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
*肽酶抑制因子Kunitz型2(SPINT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
NADP依赖性苹果酶2(ME2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
干扰素γ诱导单核因子(MIγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
原钙黏素γA2(PCDHγA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
*Ⅶ(F7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
心脏肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
UL16结合蛋白2(ULBP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
信号素4A(SEMA4A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Tolloid样蛋白1(TLL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
络丝蛋白(RL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
*酶(Arg)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
含RNA结合冷休克域蛋白E1(CSDE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
C-型凝集素域家族11成员A(CLEC11A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
*蛋白酶23(PRSS23)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
巢蛋白2(NID2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
巢蛋白2(NID2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
phospho-CREB-1(Ser133) 磷酸化CREB-1抗体
phospho-CREB-1(Ser129) 磷酸化CREB-1抗体
phospho-CREB-1(Ser142) 磷酸化CREB-1抗体
phospho-CREB-1(Ser121) 磷酸化CREB-1抗体
CREM *反应元件调节蛋白抗体
phospho-CREM (Ser271 +Ser 274) 磷酸化*反应元件调节蛋白抗体
TNFC/lymphotoxin Beta 肿瘤坏死因子C/淋巴毒素β抗体
CRF/CRH 促肾上腺皮质激素释放因子抗体
CRF/CRH 促肾上腺皮质激素释放因子抗体
MIG7 富含半*蛋白质MIG7抗体
CRHR1/CRFR1 促肾上腺皮质释放激素受体1抗体
CRHR2 促肾上腺皮质释放激素受体2抗体
CSIG 细胞衰老抑制基因抗体
Cripto-1(NT) 畸胎瘤衍化生长因子抗体(N端)
CCDC85B 卷曲螺旋结构域蛋白85B抗体
PTOV1 前列腺肿瘤高表达蛋白1抗体
Cripto-1 畸胎瘤衍化生长因子抗体(C端)
Cripto 1 monoclonal (CT) 畸胎瘤衍化生长因子单克隆抗体(C端)
Cripto 1 monoclonal 畸胎瘤衍化生长因子单克隆抗体
CSFV Polyprotein 猪瘟病毒抗体
SMN1 运动神经元生存蛋白1
CSMD1 CSMD1抗体
CRTAM CRTAM抗体
CRX1 CRX抗体
CSP 环子孢子蛋白(约氏疟原虫)抗体
C-SKI/v-SKI C-SKI抗体
NR2F2/NR2F1 载脂蛋白AI调节蛋白1抗体
Calcitonin 降钙素抗体
Calcitonin 降钙素抗体
