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EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1022操作步骤

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所  在  地上海市

更新时间:2017-07-24 17:38:16浏览次数:429次

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所在地区:上海上海市

联系人:陈小姐 (销售)

产品简介

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1022操作步骤售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称  EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1022操作步骤
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性  悬浮生长
特征特性   该细胞系来源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
传代方法   1:2传代;5-6天一次
传代情况  P3
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS 
支原体检测  荧光法(-) 
STR   -
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

细胞名称EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1022操作步骤
生长特性 贴壁生长
价格来电可享受优惠

冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
优势:
1、细胞株种类齐全,包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株,如:人滑膜细胞,人胃癌细胞,人细胞,人肾近曲小管上皮细胞,肝癌细胞,心肌细胞,子宫内膜细胞等
2、*,专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株,免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片,三天回传细胞生长状态图片,五天内有问题公司负责重发,超过五天时限至一个月内重发细胞收半价,超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠,完善、稳定的实验体系,优秀的科研队伍,*的实验设备、准确可靠的实验结果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
芳香烃受体核转位因子(ARNT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
白细胞衍生趋化因子2(LECT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
肿瘤坏死因子α诱导蛋白2(TNFαIP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
环腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Klothoβ蛋白(KLβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
脯氨酰4-羟化酶α多肽Ⅱ(P4Hα2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
N-myc下游调节基因2(NDRG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
骨桥素(OPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
70kDa热休克蛋白8(HSPA8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Ⅲ型胶原α1(COL3α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
补体应答基因32(RGC32)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
角蛋白9(KRT9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
松弛肽(RLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
无孢蛋白(ASPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
突触融合蛋白2(STX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
白介素22受体α2(IL2Rα2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
溶质载体家族3成员2(SLC3A2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
骨织素(OSTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
骨织素(OSTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
线粒体解偶联蛋白2(UCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附
 ERK1/MAPK3  丝裂原活化蛋白激酶3抗体 
 phospho-ERK1+ERK2(Thr185+Tyr187+Thr202+Tyr204)  磷酸化丝裂原活化蛋白激酶ERK抗体 
 ERK4  细胞外信号调节激酶4抗体 
 MAPK4  丝裂原活化蛋白激酶4抗体 
 phospho-ERK5(Ser496)  磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体 
 phospho-ERK5( Ser731+Thr733)  磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体 
 DUSP1/MKP1  丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体 
 Phospho-MKP1 (Ser359)  磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体 
 Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)  磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体 
 MKP-2/DUSP4  丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗体 
 ER-α  雌激素受体α抗体 
 ER/PR/c-erbB-2 Kit  ER/PR/c-erbB-2检测试剂盒(鼠单抗) 
 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167)  磷酸化雌激素受体ER alpha 抗体 
 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537)  磷酸化雌激素受体α抗体 
 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118)  磷酸化雌激素受体α抗体 
 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106)   磷酸化雌激素受体α抗体 
 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser305)  磷酸化雌激素受体α抗体 
 ER-Alpha  雌激素受体α抗体(用于western blot) 
 WASF1/WAVE 1  WAVE1蛋白抗体 
 WASF2  WASF2抗体 
 ER-Alpha  雌激素受体α抗体 
 


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