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EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0904操作步骤

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更新时间:2017-07-24 17:20:22浏览次数:274次

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联系人:陈小姐 (销售)

产品简介

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0904操作步骤售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称  EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0904操作步骤
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性  悬浮生长
特征特性   该细胞系来源于一无精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
传代方法   1:2传代;5-6天一次
传代情况  P2
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS 
支原体检测  荧光法(-) 
STR   -
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

细胞名称EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0904操作步骤
生长特性 贴壁生长
价格来电可享受优惠

冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
优势:
1、细胞株种类齐全,包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株,如:人滑膜细胞,人胃癌细胞,人细胞,人肾近曲小管上皮细胞,肝癌细胞,心肌细胞,子宫内膜细胞等
2、*,专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株,免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片,三天回传细胞生长状态图片,五天内有问题公司负责重发,超过五天时限至一个月内重发细胞收半价,超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠,完善、稳定的实验体系,优秀的科研队伍,*的实验设备、准确可靠的实验结果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
   
趋化因子C-C-基元受体1(CCR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
肝X受体α(LXRα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
成纤维细胞生长因子9(FGF9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
纤维胶凝蛋白1(FCN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
整合素β6(ITGβ6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
核糖核酸酶A(RNASE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
脂肪酸合酶(FASN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
汗酸酶αL(IDUα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
促凋亡蛋白1(APOPT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
岩藻糖变旋酶(FucM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Nesprin 4蛋白(Nesp4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
着丝粒蛋白32(CENP32)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
癌/抗原62(CTAG62)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Sugen激酶071(SGK071)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Ashwin蛋白(Ash)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
蛋白C10(C10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
B-黑色素瘤抗原5(BAGE5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
着丝粒蛋白36(CENP36)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
可溶性半乳糖苷结合凝集素16(LGALS16)检测试剂盒(
 Factor H  补体因子H抗体 
 FHL2  相互作用蛋白FHL2抗体 
 HCN4  环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型4 
 HCLS1/LckBP1  造血干细胞特异性蛋白抗体 
 HCV-Core protein  丙型肝炎病毒-C区抗体 
 ACY 3/HCV-HCBP1  丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体 
 HCV-NS1  丙型肝炎病毒-NS1抗体 
 HCV-NS3  丙型肝炎病毒-NS3抗体 
 HCV-NS4a  丙型肝炎病毒-NS4a抗体 
 HDL  高密度脂蛋白抗体 
 CD36L1/SRB1/HDL-R  高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗体 
 Heamachrome  血红素抗体 
 HER2/c-erbB2  HER2受体抗体 
 HER2 receptor  HER2受体抗体 
 HER2 receptor(NT)  HER2受体抗体 
 HER2 receptor(NT)  HER2受体抗体(N端) 
 Phospho-HER2(Tyr1221/1222)  磷酸化HER2受体抗体 
 Phospho-HER2(Tyr1112)  磷酸化HER2受体抗体 
 Phospho-HER2(Tyr1248)  磷酸化HER2受体抗体 
 Phospho-HER2 (Tyr877)  磷酸化HER2受体抗体 
 Phospho-HER2 (Tyr686)  磷酸化HER2受体抗体 
 HER3/ErbB3  HER3受体抗体 
 HER2 receptor(1A4)   HER2受体单克隆抗体 
 Phospho-HER3 (Tyr1197)  磷酸化HER3受体抗体 
 Phospho-HER3 (Tyr1222)  磷酸化HER3受体抗体 
 Phospho-HER3 (Tyr1289)  磷酸化HER3受体抗体 
 Phospho-HER3(Tyr1328)  磷酸化HER3受体抗体 
 Hes5  发状分裂相关增强子-5抗体 
 Hepatitis E Virus ORF3   戊型肝炎病毒


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