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显色培养基操作流程

阅读:131发布时间:2018-10-22

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显色培养基操作流程

1. 固体和半固体样品:称取 25 g 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min~10000 r/min 均质 1 min~2 min,或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打 1 min~2 min,制成 1:10 的样品匀液。

2 液体样品:以无菌吸管吸取 25 mL 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠中,充分混匀,制成 1:10 的样品匀液。

3 用 1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液 1 mL,沿管壁缓慢注于盛有 9 mL 稀释液的无菌试管中注意吸管或吸头不要触及稀释液面,振摇试管或换用1 支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成 1:100 的样品匀液。

4 按 6.1.3 操作程序,制备 10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用 1 次 1 mL 无菌吸管或吸头。

5 根据对样品污染状况的估计,选择 2 个~3 个适宜稀释度的样品匀液液体样品可包括原液,在进行 10 倍递增稀释时,吸取 1 mL 样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取 1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。

6 及时将 15 mL~20 mL 冷却至 46 ℃的平板计数琼脂培养基可放置于 46  ±1  ℃℃恒温水浴箱中保温倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。


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