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上海邦景实业有限公司
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阅读:149发布时间:2018-5-21
湿色培养基使用前处理:
1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的2%(W/V)*和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水*清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
实验方法
(1)无菌条件下剔除坏死及非肿瘤组织,用Hanks液冲洗1次。
(2)用下述方法之一将肿瘤组织分散为单细胞:
1)机械分散法:充分剪碎肿瘤组织,经100目和200目不锈钢网挤压过滤,收集细胞。
2)酶消化分散法:充分剪碎肿瘤组织,首先经o.1%胶原蛋白酶37℃下消化20min,再用O.25%*一O.02%EDTA混合液(1:1)37℃下消化,收集细胞。
(3)将分散的细胞悬液加入含100%和75%淋巴细胞分离液的梯度离心管中,2000r/min离心20min,吸取zui上层(75%分离液的界面上)的肿瘤细胞。
(4)用Hanks液离心洗涤2次,弃上清液,加入适量培养液重新悬浮细胞。
(5)立即将肿瘤细胞悬液以每孔103~104个细胞接种于96孔培养板(200μl/孔),同时加入事先确定浓度梯度的各组抗癌药10μl/孔(对照组加入培养液10μl/孔)。在37℃、5%CO2孵箱中培养48~72h(培养时间取决于实验的目的和要求)。
(6)每孔加入MTT(5mg/m1)20μl,37℃作用4h。
(7)小心吸弃各孔内的上清液,对于悬浮生长的细胞需1000r/min离心5min,然后再吸弃上清液。每孔加入DMSO 150μl,振荡,使紫蓝色沉淀充分溶解,用酶标仪在波长450~600nm处测定吸光度A值。
(8)各药物浓度组设3个平行孔,实验重复3次,取平均值计算药物作用后肿瘤细胞生长抑制率。
湿色培养基凝聚素(CLU)ELISA试剂盒 ,英文名: CLU ELISA Kit
凝胶原蛋白(gelson)ELISA试剂盒 ,英文名: gelson ELISA Kit
尿肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体死亡受体4(TRAIL-DR4)ELISA试剂盒 ,英文名: TRAIL-DR4 ELISA Kit
尿游离*(UFC)ELISA试剂盒 ,英文名: UFC ELISA Kit
尿微量白蛋白(MAU/ALB)ELISA试剂盒 ,英文名: MAU/ALB ELISA Kit
尿微量白蛋白(MAU)ELISA试剂盒 ,英文名: MAU ELISA Kit
尿微量白蛋白(ALB)ELISA试剂盒 ,英文名: ALB ELISA Kit
尿素酶相关蛋白C(UreC)ELISA试剂盒 ,英文名: UreC ELISA Kit
*核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA试剂盒 ,英文名: UPP1 ELISA Kit
*型纤溶酶原激活因子(uPA)ELISA试剂盒 ,英文名: uPA ELISA Kit
*型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒 ,英文名: PLAUR/uPAR ELISA Kit
*型纤溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA试剂盒 ,英文名: uPA/PLAU ELISA Kit
*型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒 ,英文名: uPA ELISA Kit
*型纤溶酶原激活剂受体(uPAR)ELISA试剂盒 ,英文名: uPAR ELISA Kit
*(UK)ELISA试剂盒 ,英文名: UK ELISA Kit
尿肌酐(UCR)ELISA试剂盒 ,英文名: UCR ELISA Kit
尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)ELISA试剂盒 ,英文名: UGCG ELISA Kit
尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶2(UGT2)ELISA试剂盒 ,英文名: UGT2 ELISA Kit
尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1(UGT1)ELISA试剂盒 ,英文名: UGT1 ELISA Kit
尿蛋白(UP)ELISA试剂盒 ,英文名: UP ELISA Kit
尿17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒 ,英文名: 17-OHCS ELISA Kit湿色培养基
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