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怎么选择合适的植物内参抗体?

阅读:558发布时间:2018-12-25

在等量蛋白上样的前提下,内参抗体对于正确解释Western blot的结果至关重要。内参通常是蛋白质,在所检测的细胞类型或者样品中表现出稳定地高表达。

选择作为内参的蛋白质具有与目标蛋白质不同的分子量,以便区分和量化目的蛋白条带。那么怎么选择合适的植物内参抗体呢?

首先考虑样本来源,植物样本需要选用植物细胞表达稳定的蛋白比如Actin或者Rubisco作为内参

其次要考虑目的蛋白的分子量大小,我们*内参要与检测的目的蛋白的分子量相差5kD以上,以区分目的蛋白条带

后,考虑目的蛋白的表达定位,选择对应的内参抗体,比如,全细胞、细胞核、线粒体等等。同时,在特定条件下,内参蛋白的表达会出现异常,应该将其考虑在内。

鉴于以上,Agrisera植物内参抗体尤为合适优势是适用于植物和藻类,而且在很多种属类型中得到验证,发表过很多文献,应用范围广泛。

Agrisera植物内参抗体的分子量和表达定位:

组蛋白H3抗体应用于WB(拟南芥)和免疫细胞化学分析(蚕豆)的实例:

Agrisera植物内参抗体发表文章:

1. Overexpressing the H﹑rotein of the glycine cleavage system increases biomass yield in glasshouse and fieldゞrown transgenic tobacco plants. Plant Biotechnology Journal. 2018.

2. Extended darkness induces internal turnover of glucosinolates in Arabidopsis thaliana leaves. PLoS One. 2018.

3. The Arabidopsis transcription factor bZIP11 activates auxin-mediated transcription by recruiting the histone acetylation machinery. Nature Communications.2014

4. Co-localization of P-glycerate kinase, P-ribulokinase, ADP-glucose pyrophosphorylase and Rubisco activase with CF1 in pea leaf chloroplasts. Plant Science. 2009

5. Complementation of a mutation in CpSRP43 causing partial truncation of light-harvesting chlorophyll antenna in Chlorella vulgaris. Scientific Reports. 2017

6. Biology of a widespread unc*ted archaeon that contributes to carbon fixation in the subsurface. Nature Communications.2014

7. Tomato yellow leaf curl virus infection mitigates the heat stress response of plants grown at high temperatures. Scientific Reports. 2016


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