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上海邦景实业有限公司
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单细胞悬浮液1mL实验方法运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
单细胞悬浮液1mL实验方法产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
单细胞悬浮液1mL实验方法产品介绍：
合成建文库用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。
灵敏度试验：合格
〖灼烧残渣〗(以〖硫酸盐〗计)：≤20.0%
水溶解试验：合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：棕色粉末，能溶于热水，冷却后成红棕色溶液，稍溶于醇，并呈棕光品红色；微溶于丙同。遇过量盐酸生成棕紫色沉淀；在浓硝酸中呈枯桔黄色；遇氢氧呈深蓝色，后变红色，溶于浓硫酸成蓝色溶液，稀释后生成棕色沉淀。水中溶解度（90℃）为25g/L。染色时遇铜、〖铁〗时色光影响较大。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)测定水硬度用指示剂，金属络合指示剂，测定钙、镁、钡、姻、锰、〖铅〗、钪、锶、〖锌〗和锆
〖保存〗：RT
铬蓝R
〖英文名称〗：Eriochrome blue black R；Mordant Black 17；Acid chrome blue black；Palatine chrome black 6BN；Calcon；Chrome blue black R；Anthracene blue black；Solochrome dark blue
〖其他名称〗：依来铬蓝R；酸性媒介R；酸性铬蓝R；酸性媒介蓝；茜素蓝；铬兰R；钙试剂；媒介17；3-羟基-4-(2-羟基-1-萘偶氮)-1-萘磺酸钠；宫殿染料；钙紫红素
〖CAS号〗：2538-85-4
C20H13N2NaO5S=416.39
〖级别〗：IND
灵敏度试验：合格
乙醇溶解试验：合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：棕色或深棕色粉末，溶于水和乙醇。水溶液呈紫色溶液，加盐酸于水溶液中有棕色沉淀，醇溶液为蓝红色，浓硝酸溶液为黄色，氢氧溶液为枣红色，硫酸液为蓝色，用水稀释析出红色沉淀。zui大吸收波长569nm。有刺激性
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)络合指示剂。测定钙、镁、镉、锰和〖锌〗。荧光分析测铝。测定水硬度
酸水解酪素 - 混合液
DMEM( 高糖 ) 酚 - - 混合液 (RNA 提取 )
DMEM( 低糖 ) 酚 - - 混合液 (DNA 提取 )
供体马血清 Earle 溶液
弗氏不*佐剂 杜氏 PBS 缓冲液 ,10×
DH10B 感受态细胞 溴化乙锭干粉 (EB)
XL2-Blue 感受态细胞 SSPE 溶液 ,20×
BL21-CodonPlus(DE3) 感受态细胞 超快蛋白银染试剂盒
Rosetta 感受态细胞 质谱兼容型蛋白银染试剂盒
AGL1 农杆菌感受态细胞 BLOTTO 溶液
EHA105 农杆菌感受态细胞 干粉型 SOB 培养基
GV3101 农杆菌感受
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