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上海邦景实业有限公司
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天净沙 SPIA 扩增试剂盒 （ 用于扩增 DNA 模板 ）20 次原理运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
天净沙 SPIA 扩增试剂盒 ( 用于扩增 DNA 模板 )20 次原理产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
天净沙 SPIA 扩增试剂盒 ( 用于扩增 DNA 模板 )20 次原理产品介绍：
天净沙 SPIA 扩增试剂盒 ( 用于扩增 DNA 模板 )20 次原理合成建文库用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
天净沙 SPIA 扩增试剂盒 ( 用于扩增 DNA 模板 )20 次原理按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。
〖级别〗：试剂级
总重量：138～142mg
λmax(1Tab/100ml)：336～346nm
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：片剂。Each tablets contain 10mg of ABTS for quick and easy preparation of substrate solution.
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)The product is supplied as a ready-to-use peroxidase substrate containing 2,2-azino-bis(3-ethylbenz-thiazoline-6-sulfonic acid) in an acidic buffer.The substrate should be colorless prior to reaction with peroxidase.It will develop a blue-green reaction product when reacted with peroxidase in microwell applications(e.g.ELISA assays).For end-point assays,1% sodium dodecyl sulfate(SDS) may be used to stop the reaction.This will also result in a blue-green end product.Since this substrate produces a soluble reaction produet,it is not recommended for blotting or histochemical applications.
〖保存〗：-20℃
天青石蓝
〖英文名称〗：Celestine blue B；Celestine blue B；Mordant Blue 14；C.I. 51050
〖其他名称〗：天青石兰；媒介蓝14；天青石蓝B；媒染蓝14
〖CAS号〗：1562-90-9
C17H18C1N3O4=363.80
〖级别〗：For microscopic
纯度：≥80.0%
〖熔点〗：227～230℃
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：绿色粉末。在15℃时，水中溶解度为2％，无水乙醇中为2.25％，乙二醇中为6.5％，二甲苯中为0.005％。水溶液呈红紫色，极稀时呈蓝色。乙醇溶液在任何浓度均呈蓝色。zui大吸收波长 630～640nm。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)生物染色剂，用于核细胞组织和结缔组织染色。可代替苏木精，用于显微镜〖用途〗
天净沙 SPIA 扩增试剂盒 ( 用于扩增 DNA 模板 )20 次原理滋养层细胞生长因子 6nt 随机引物 ( 抗水解 )，0.5mM
5(6)-CFDA 菌素 D 溶液 ,1mg/mL
5(6)-TRITC 可溶性两性霉素 B 溶液 ,20mg/mL
5-Carboxyfluorescein *溶液 ,100mg/mL
5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester *钠溶液 ,50mg/mL
5-FITC *溶液 ,100mg/mL
Acridine Orange(AO) *溶液 ,100mg/mL
Actin-Tracker Green( 微丝绿色荧光探针 ) 细胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL
BCECF AM * A 溶液 ,10mg/mL
Calcein 菌酮溶液 ,100mg/mL
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