单细胞全基因组扩增试剂盒30 次实验步骤合成建文库用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
单细胞全基因组扩增试剂盒30 次实验步骤按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。
产品介绍：
产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
〖保存〗：RT
苯芴酮
〖英文名称〗：Phenylfluorone；2,6,7-Trihydroxy-9-phenylisoxanthen-3-one；Florone black；9-Phenyl-2,6,7-trihydroxy-3-fluorone；2,6,7-Trihydroxy-9-phenyl-3H-xanthen-3-one；9-Phenyl-2,3,7-trihydroxy-6-fluorone 2,3,7-Trihydroxy-9-phenylxanthen-6-one；2,6,7-Trihydroxy-9-phenylfluor
〖其他名称〗：锗试剂；苯基芴酮；苯基荧光酮；2,6,7-三羟基-9-苯基荧光酮；2,6,7-三羟基-9-苯基-3H-呫吨-3-酮；9-苯基-2,3,7-三羟基-6-氧蒽酮；2,6,7-三羟基-9-苯基-6-荧光酮；9-苯基-2,3,7-三羟基-6-荧光酮
〖CAS号〗：975-17-7
C19H12O5=320.30
〖级别〗：AR
乙醇溶解试验：合格
对锗灵敏度试验：合格
〖灼烧残渣〗(以〖硫酸盐〗计)：≤0.1%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：橙红色结晶性粉末。易溶于碱，溶于乙醇盐酸和乙醇硫酸的混合液，微溶于乙醇，不溶于水、苯和氯方。〖熔点〗>300℃。zui大吸收波长 552nm。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)光度测定锗、钼、铌、锑、锡和钽等。
〖保存〗：RT，避光
1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基吡唑啉酮
〖英文名称〗：HPMBP；PMBP；4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one
〖其他名称〗：1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基-5-吡唑啉酮；4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮；萃取剂II；4-苯甲酰-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮；4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-2-吡唑-5-酮
〖CAS号〗：4551-69-3
C17H14N2O2=278.31
〖级别〗：AR
SP600125(JNK 抑制剂 ) JM107 菌种
Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制剂 ) JM109(DE3) 菌种
Staurosporine(PKC 抑制剂 ) K802 菌种
Superoxide dismutase( 抗氧化酶 ) M15 菌种
TLR4 激活剂 Novablue(DE3) 菌种
Tocopherol( 抗氧化剂 ) Origami(DE3) 菌种
Trequinsin(PDE III 抑制剂 ) Origami B(DE3) 菌种
Trichostatin A(HDAC 抑制剂 ) Origami(DE3)plysS 菌种
U0126(MEK1/2 抑制剂 ) Rosetta 菌种
Vinblastine( 长春新碱 ) RosettaBlue(DE3) 菌种
Wortmannin(PI3K 抑制剂 ) BL21（DE3）菌种
Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor) SG1117 菌种
敏 PCR 法
