酪蛋白50g实验步骤

酪蛋白50g实验步骤使用方法: 
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
酪蛋白50g实验步骤产品介绍：

磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：

2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。

NutrientAgar
液体硫乙醇酸盐培养基 Thiolglycollate Medium 用于产气荚膜梭菌确证试验的细菌培养(GB.SN标准)
乳糖肉汤培养基 Lactose Broth Medium 250克 用于食品中沙门氏菌检验前增菌;大肠菌的增菌培养
MR-VP培养基用于大肠杆菌的甲基红和VP试验(SN标准)incubationmediaMR-VP培养基用于大肠杆菌的甲基红和VP试验(SN标准)
StaphylococcusSelectiveAgar10
伊红美蓝琼脂(EMB)250g弱选择性培养基，用于肠道菌的选择性分离
卵黄琼脂培养基基础 Egg Yolk Agar Base 用于肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养(GB标准)
BGLB肉汤 BGLB Broth 250克 用于水样中大肠菌的检测
结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)用于大肠菌的固体平板检测(SN标准)incubationmedia结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)用于大肠菌的固体平板检测(SN标准)
*卵黄培养基基础 250g 用于*的分离培养，需加入50%卵黄乳液(Japan方法)
Eosin-MethyleneBlueAgar
动力-盐培养基 Power - nitrate medium 用于产气荚膜梭菌的动力试验
TSP肉汤基础 Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 250克 蜡样芽孢杆菌的MPN值测定
西蒙氏枸橼酸盐琼脂用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验(GB标准)incubationmedia西蒙氏枸橼酸盐琼脂用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验(GB标准)
Egg-YolkMannitolSaltagarBase
品红亚钠琼脂250g用于饮用水，水源水中总大肠菌的选择性分离和确证(GB标准)
含铁牛奶培养基 Iron milk medium 用于产气荚膜梭菌的牛奶发酵试验
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基 BCP Glucase Peptone Water Medium 250克 用于压力蒸汽灭菌效果评价
肠道菌计数琼脂(VRBDA)用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别(MERCK方法)incubationmedia肠道菌计数琼脂(VRBDA)用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别(MERCK方法)
改良Giolitti-Cantobi肉汤 250g 用于*的增菌培养
FuchsinBasicSodiumSulfiteAgar
梭菌鉴别琼脂(DCA) Differentia Clostridial Agar 用于干燥食品亚盐还原梭菌的计数和培养
胰酪胨大豆肉汤 TSB 250克 一种通用的微生物营养增菌肉汤，也可用于*的MPN测定和线无菌灌装试验
菌种保存培养基用于常用细菌斜面传代及室温保存incubationmedia菌种保存培养基用于常用细菌斜面传代及室温保存
ModifiedGiolitti-CantoniBroth
EC肉汤250g用于粪大肠菌、大肠杆菌的测定(GB、SN标准)
强化梭菌鉴别琼脂(DRCA) Differentia Reinforced Clostridial Agar 用于食品和其它物质中梭菌的计数和培养(MERCK方法)
*大豆琼脂 TSA 250克 用于生物制品的无菌试验
乳糖蛋白胨培养液用于饮用水，水源水中总大肠菌的测定(GB标准)incubationmedia乳糖蛋白胨培养液用于饮用水，水源水中总大肠菌的测定(GB标准)
TMP琼脂培养基 250g 用于*的分离培养
E.ColiBroth
强化梭菌琼脂 Reinforced Clostridium Agar 用于梭菌的分离培养
胰胨大豆琼脂斜面 Tryptic Soy Agar 250克 培养副溶血性弧菌，做细胞色素氧化酶实验
Cary-Blair氏*250用于运送肠道致病菌标本incubationmediaCary-Blair氏*250用于运送肠道致病菌标本
TMPAgar
MFC琼脂250g用于大肠菌的滤膜法检测
强化梭菌培养基(RCM) Reinforced Clostridium Medium 用于梭菌的分离培养
碱性蛋白胨水 AP 250克 增殖霍乱弧菌及付霍乱弧菌
哥伦比亚血琼脂基础250营养非常丰富，用各种细菌的基础培养基(AFNOREPIDF标准)incubationmedia哥伦比亚血琼脂基础250营养非常丰富，用各种细菌的基础培养基(AFNOREPIDF标准)
(脑)心浸液琼脂 250g 本产品主要用于培养营养要求高的细菌，是一款营养极其丰富的培养基。
mFCAgar
TSN琼脂 TSN Agar 用于产气荚膜梭菌的平板计数
孟加拉红培养基 Rose Bengal Agar 250克 霉菌和酵母菌的总数测定
亮绿乳糖培养基250用于饮用天然矿泉水中大肠杆菌的检验(GB标准)incubationmedia亮绿乳糖培养基250用于饮用天然矿泉水中大肠杆菌的检验(GB标准)
BrainHeartInfusionBroth
MMO-MUG培养基250g用于生活饮用水及其水源水中大肠菌和大肠埃希氏菌的同时检测
TBB培养基 Tyrobutyricum Broth Base 用于乳酪产品中梭菌的计数
BiGGY琼脂 BiGGY Agar 250克 用于念珠菌的分离培养
肠道菌增菌肉汤(EE肉汤)250用于肠道菌的增菌培养(GB、FDA标准)incubationmedia肠道菌增菌肉汤(EE肉汤)250用于肠道菌的增菌培养(GB、FDA标准)
葡萄球菌选择性琼脂 250g 用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性分离培养
MMO-MUGMedium
CHO培养基基础 CHO Medium Base 用于厌氧菌的糖生化反应
氯硝胺孟加拉红琼脂 DRBC Agar 250克 食品中霉菌及酵母菌的分离培养
TTC营养琼脂250用于细菌总数测定incubationmediaTTC营养琼脂250用于细菌总数测定
StaphylococcusSelectiveAgar
MUG营养琼脂250g用于滤膜法检测生活饮用水及其水源水中大肠埃希氏菌
SCHAEDLER琼脂 SCHAEDLER AGAR 用于厌氧菌的分离培养
WORT琼脂 WORT Agar 250克 用于真菌,特别是酵母菌的计数和增菌培养
LB肉汤250用于细菌培养incubationmediaLB肉汤250用于细菌培养
10%钠胰酪胨大豆肉汤 250g 用于*的MPN测定，增菌培养(GB标准)
MUGNutrientAgar
厌氧菌琼脂 Anaerobic Agar 用于厌氧菌的分离培养
WORT肉汤 WORT Broth 250克 真菌和酵母菌的培养
LB营养琼脂250用于细菌培养incubationmediaLB营养琼脂250用于细菌培养
10%NaClTrypticSoyBroth
EC-MUG培养基用于生活饮用水及其水源水中大肠埃希氏菌的检测
CDC厌氧菌琼脂 CDC Anaerobic Agar 用于厌氧菌的分离培养
Littman琼脂 Littman Agar 250克 真菌的分离培养
苯*脱氨酶培养基于苯*脱氨酶试验incubationmedia苯*脱氨酶培养基于苯*脱氨酶试验
营养琼脂斜面 250g 用于细菌的纯化培养
EC-MUGMedium
亚盐还原厌氧菌孢子液体培养基 用于亚盐还原厌氧菌孢子的增菌培养。
YM肉汤 YM Broth 250克 BR
哥伦比亚MUG培养基250用于大肠杆菌的荧光检测(SN标准)incubationmedia哥伦比亚MUG培养基250用于大肠杆菌的荧光检测(SN标准)
Nutrientagarslant
MUG营养琼脂(NA-MUG)用于滤膜法检测生活饮用水及其水源水中大肠埃希氏菌
WILKINS-CHALGREN琼脂 WILKINS-CHALGREN Agar 用于厌氧菌的分离培养
*葡萄糖酵母粉琼脂基础 OGY Agar 250克 霉菌、酵母菌分离培养和计数
22250用于海生细菌的培养和计数incubationmedia22250用于海生细菌的培养和计数
*钠琼脂 250g 用于*的选择性分离培养(中国药典)
MUGNutrientAgar
MCP琼脂 MCP Agar 用于产气荚膜梭菌的计数和培养
华伦斯坦实验室营养琼脂 WL Nutrient Agar 250克 啤酒和发酵产品中酵母菌和细菌的计数
肠球菌琼脂(胆盐-七叶苷-叠钠琼脂)250用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养(Acumedia方法)incubationmedia肠球菌琼脂(胆盐-七叶苷-叠钠琼脂)250用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养(Acumedia方法)
ManitolSaltAgar

〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：深红色结晶性粉末。易溶于水。在中性和酸性溶液中呈红色，在碱性溶液中呈紫色，在弱酸溶液中与一系列元素反应都由红色变为紫色，仅与六价铀反应呈浅蓝色。与铀(Ⅵ)生成络合物的zui大吸收波长 605nm。摩尔吸光系数为2.31×105，溶液的吸光度在pH为5.2～8.0范围内可保持不变。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)光度测定铀(Ⅵ)。珠墨铸〖铁〗、铝合金、〖锌〗合金中测定镁
〖保存〗：RT
偶氮氯膦Ⅲ
〖英文名称〗：CPA-Ⅲ；Chlorophosphonazo Ⅲ；3,6-Bis[(4-chloro-2-phosphonophenyl)azo]-4,5-dihydroxynaphthalene-2,7-disulphonic acid 
〖其他名称〗：偶氮氯磷Ⅲ；2，7-双(4-氯-2-膦羧苯偶氮)-1，8-二羟基萘-3，6-二磺酸；氯膦酸偶氮III
〖CAS号〗：1914-99-4 
C22H16Cl2N4O14P2S2?4H2O=801.33
〖级别〗：显色剂
对稀土金属灵敏度试验：合格
水溶解试验：合格
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：紫褐色结晶性粉末。易溶于水，微溶于乙醇和丙同，不溶于乙迷、苯、氯方。在pH＜3的水溶液中呈玫瑰红色，pH=3的水溶液中呈玫瑰红色略带紫色，pH＞4时转为紫色。在浓硫酸中呈浅绿色。在浓硝酸中分解。在氢氧和碳酸钠溶液中呈浅蓝色。摩尔吸光系数为74，500～75，500，具有比偶氮胂Ⅰ更高的络合性能。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)分光光度测定铀和钙。可在不同条件下与钙、钡、镁、铜、〖锌〗、〖铅〗、〖铁〗、钴、〖镍〗、铍、铝、钇、钍、铈和铵等形成有色络合物
〖保存〗：RT
偶氮氯膦mA
〖英文名称〗