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上海邦景实业有限公司
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小牛胸腺 DNA 溶液1mL实验步骤运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
小牛胸腺 DNA 溶液1mL实验步骤磷酸化反应（前反应）：
1. 在微量离心管中制备下列反应液：
2. 37℃反应 30 分钟。
3. 下面的操作与交换反应的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的标记：
当掺入水平很低的时候，需要使用本步骤，即通过体积排阻色谱或过滤试 剂盒除去未反应的标记。Sephadex G-50 层析柱（需另购）对于去除未掺入 的 dNTPs 效果很好，它还能大幅减少小于 20 个碱基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的双链 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加热 5～10 分钟以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 层析柱可以用来纯化长度不小于 10 个 碱基的寡核苷酸。
小牛胸腺 DNA 溶液1mL实验步骤使用方法:
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交换反应缓冲液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 灭菌的超纯水 补足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端约等于 0.17 μg 的长 100 bp 的双链 DNA。
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 *将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时，请在第
8 步之后进行。
产品介绍：
磷酸化反应标记：
A. 去磷酸化反应
1. 实验前需自备的试剂：TE 饱和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小肠碱性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量离心管中制备下列反应液： 成分 加入的体积 自备的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小肠碱性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 灭菌的超纯水 补足到 150 μL
3. 50℃反应 30 分钟。
4. 加入 150 μL 的 TE 饱和酚//（25：24：1），充分混匀。
5. 离心，取上层（水层）移到另一个微量离心管中。
6. 重复操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui终浓度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
9. 离心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
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抗生素检定培养基7号 Antibiotic Agar NO.7 用于噻肟钠灯的效价测定
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亮绿乳糖胆盐培养液(BGB)250g用于大肠菌的确证试验
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SIM培养基 250g 用于硫化氢、动力、吲哚试验
〖其他名称〗：酸性红27；萘酚红；偶氮品红S；1-（4′-磺基-1′-萘偶氮）-2-萘酚-3，6-二磺酸三钠盐；鸡冠花红；蓝光酸性红；对磺基萘偶氮-R-盐；食用色素红色2号；酸性苋菜红；食品红9
〖CAS号〗：915-67-3
C20H11N2Na3O10S3=604.47
〖级别〗：BS
〖含量〗：≥85.0%
红外光谱鉴定：和对照品匹配
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：深红棕色粉末。溶于水、甘油、丙二醇和盐酸，水溶液为玫红色、 微溶于乙醇。盐酸对本品水溶液无变化，氢氧对本品使颜色加深，硫酸对本品为紫色溶液，稀释时为蓝紫色而后为品红色。〖相对密度〗约1.50
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)氧化还原指示剂，如作滴定三价〖砷〗、锑及联氨的指示剂。组织培养中细胞染色。彩色显微照相。
〖保存〗：RT，避光
剂。测定钙、锶
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