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上海抚生实业有限公司
兔眼Tenon's囊成纤维细胞;RYTF特性现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
兔眼Tenon's囊成纤维细胞;RYTF特性 | 贴壁生长 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称 兔眼Tenon's囊成纤维细胞;RYTF特性
形态特性 成纤维样
生长特性 贴壁生长
特征特性 北京眼科研究所建系细胞。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2~1:3传代;3~4天1次。
传代情况 P4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人AT丰富结合域1A(ARID1A)免疫试剂盒 Human ARID1A ELISA Kit
人Apelin 免疫试剂盒 Human Apelin ELISA kit
人Apelin 36(AP36)免疫试剂盒 Human apelin 36,AP36 ELISA Kit
人apelin 13(AP13)免疫试剂盒 Human apelin 13,AP13 ELISA Kit
人apelin 12(AP12)免疫试剂盒 Human apelin 12,AP12 ELISA Kit
人AP-5复合物β亚基(PP1030)免疫试剂盒 human PP1030 ELISA Kit
人alpha突触核蛋白(淀粉样前体非A4成分蛋白)低聚物(SNCA oligomer)免疫试剂盒 Human SNCA oligomer ELISA Kit
人Alpha-D 生育酚/*(Alpha-D TPL)免疫试剂盒 Human Alpha-D-tocopherol,Alpha-D TPL ELISA Kit
人alpha-1肾上腺素能受体(ADRA1)IgG抗体免疫试剂盒 人alpha-1肾上腺素能受体(ADRA1)IgG抗体ELISA Kit三乙烯四胺 Triethylenetetramine 112-24-3
三乙酰氧基硼氢化钠 Sodium triacetoxyborohydride 56553-60-7
三异丙醇胺环硼酸酯 Triisopropanolamine cyclic borate 101-00-8
三异丙基硅烷 Triisopropylsilane 6485-79-6
三正十二胺 TRIDODECYLAMINE 102-87-4
三丙胺;三正丙胺 TripropylaMine;Tri-n-propy-laMine 102-69-2
三正丁胺 Tributylamine 102-82-9
三正辛胺 Tri-n-octylamine 1116-76-3
三辛基氧化膦;三正辛基氧化膦 Trioctylphosphine oxide;TOPO 78-50-2
三棕榈酸甘油酯(-20°C) TRIPALMITIN 555-44-2
色胺;β-吲哚基乙胺;2-(3-吲哚基)乙胺;3-(2-氨乙基)吲哚 TryptaMine;3-(2-AMinoethyl)indole;1H-Indole-3-ethanaMine 61-54-1
沙保罗氏琼脂 NA
沙保罗氏琼脂(见69060761) NA
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