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犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild特性

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所  在  地上海市

更新时间:2017-02-13 11:32:38浏览次数:374次

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产品简介

犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild特性现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!

详细介绍

犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild特性来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

细胞名称  犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild特性
形态特性   上皮细胞样
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞系源自一只雌性英国可卡犬的肾脏组织,由S.H. Madin and N.B. Darby于1958年建立。该细胞为角蛋白阳性细胞。 
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法   1:3传代,2-3天传一代
传代情况  C7
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  阴性
STR   STR鉴定
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

产品名称生长特性发货地货期
贴壁生长上海3-5天

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人P0蛋白抗体(IgG)免疫试剂盒    Human myelin protein zero antibody IgG ELISA Kit
人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)免疫试剂盒    Human anti-OJ-antibody,OJ/IleRS ELISA Kit
人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-*(AcSDKP)免疫试剂盒    Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)免疫试剂盒    Human N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit
人N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)免疫试剂盒    Human N-methyl-D-aspartic Acid Receptor,NMDAR ELISA Kit
人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)免疫试剂盒    Human N-Cad ELISA kit
人N端中段骨钙素(N-MID-OT)免疫试剂盒    Human N-MID-OT ELISA Kit
人N端前脑钠素(NT-proBNP)免疫试剂盒    Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA KIT乳酸脱氢酶(+4℃)    L-Lactic dehydrogenase    9001-60-9
乳糖一水    Lactose Monohydrate    5989-81-1
乳糖胆盐发酵管培养基    NA    
乳糖胆盐培养基    Lactose Bile Medium    
乳糖蛋白胨培养基    Lactose medium    
乳糖发酵培养基    Lactose Ferment Broth    
乳糖肉汤    LACTOSE BROTH FOR MICROBIOLOGY*    
软骨素酶 (-20℃)    CHONDROITINASE ABC    9024-13-9
噻吩-2.5-二羧酸97%    2,5-Thiophenedicarboxylic acid    4282-31-9
噻吩-2-磺酰氯    2-Thiophenesulfonyl chloride    16629-19-9
噻吩-2-甲醛    ;    1998/3/3
噻唑蓝    Thiazolyl Blue    298-93-1

 

 


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