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叙利亚仓鼠肾细胞系;BHK-21?CIAPIN1+使用说明书

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所  在  地上海市

更新时间:2017-02-13 10:56:28浏览次数:341次

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产品简介

叙利亚仓鼠肾细胞系;BHK-21?CIAPIN1+使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

产品名称叙利亚仓鼠肾细胞系;BHK-21?CIAPIN1+使用说明书
货期3-5天
发货地上海

细胞名称  叙利亚仓鼠肾细胞系;BHK-21?CIAPIN1+使用说明书
形态特性   上皮样
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法   1:3传代,3-4天传1次
传代情况  C5
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  未定

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
人补体片段3c(C3c)免疫试剂盒    Human Complement fragment 3c,C3c ELISA Kit
人补体片段3b受体(C3bR)免疫试剂盒    Human C3bR ELISA Kit
人补体蛋白9(C9)免疫试剂盒    Human C9 ELISA Kit
人补体蛋白5(C5)免疫试剂盒    Human Complement 5,C5 ELISA Kit
人并殖吸虫抗体(IgM)免疫试剂盒    Human Anti-Paragonimus antibody IgM ELISA kit
人并殖吸虫抗体(IgG)免疫试剂盒    Human Anti-Paragonimus antibody IgG ELISA kit
人丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCV core Ag)免疫试剂盒    Human Hepatitis C Virus (HCV) Core Antigen,HCV core Ag ELISA kit
人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)免疫试剂盒    Human Hepatitis C virus IgM,HCV-IgM ELISA Kit
人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)免疫试剂盒    Human Hepatitis C virus IgG,HCV-IgG ELISA Kit
人丙酰*羧化酶β多肽(PCCB)免疫试剂盒    Human PCCB ELISA Kit
人(ACR)免疫试剂盒    Human acrolein,ACR ELISA kit邻氟氯苄    alpha-Chloro-o-fluorotoluene    345-35-7
邻氟溴苯    2-Bromofluorobenzene    1072-85-1
2-甲基苯腈    o-Tolunitrile    529-19-1
邻甲*络合剂    o-Cresolphthalein Complexone    2411-89-4
2-溴    2-BroMotoluene    95-46-5
邻乙酰氨基*    2-Acetamidophenol    614-80-2
2-乙氧基苯甲酸;邻乙氧基苯甲酸;水杨酸    2-Ethoxybenzoic acid;o-Ethoxybenzoic acid;Salicylic acid ethyl ether    134-11-2
磷酸 99%    PHOSPHORUS STANDARD SOLUTION, STABILIZED, 1 MG/ML P IN WATER, FOR AAS    
磷化钙(*)    CALCIUM PHOSPHIDE    1305-99-3
钼磷酸    PHOSPHOMOLYBDIC ACID    12026-57-2
磷钼酸铵    AMMONIUM PHOSPHOMOLYBDATE HYDRATE    54723-94-3
磷酸-5’-吡哆醛(+4℃)    Pyridoxal phosphate    54-47-7
磷酸铵    Triammonium phosphate trihydrate    25447-33-0
磷酸吡哆醛    3-Hydroxy-2-methyl-5-([phosphonooxy]methyl)-4-pyridinecarboxaldehyde    853645-22-4

 

 


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