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小鼠杂交瘤细胞株;LB_001使用说明书

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更新时间:2017-02-08 09:47:12浏览次数:118次

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产品简介

小鼠杂交瘤细胞株;LB_001使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称  小鼠杂交瘤细胞株;LB_001使用说明书
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性  悬浮生长
特征特性   该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法   1:3传代,3-4天传1次
传代情况  C5
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  未定

产品名称小鼠杂交瘤细胞株;LB_001使用说明书
货期3-5天
发货地上海

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
Xylitol    戊五醇    500U    高纯,98%
Xylenol Orange    二甲酚桔黄    1克    IND
Xylene cyanole FF    酸性蓝147    25克    BR,99%
Xylene cyanole FF    二甲苯花黄FF    500克    高纯,98%
Xylene blue    酸性蓝1    100克    特纯,98%
Xylanase    木聚糖酶    100克    精制级,2000U/mg
Xylan    半木质    0.25UN    超纯,98%
XOD    黄嘌呤氧化酶    100克    高层析纯,12ku/mg;液体
Xmol/L-Hydrochloric acid Buffer solution    Xmol/L盐酸缓冲液    1公斤    BR,98%
X-GlcA    5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄苷酸环己氨盐    25克    高纯,6000U/mg;80%小鼠钙调素(CAM)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse calmodulin,CAM ELISA Kit    ,规格:    48T/96T
小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit    ,规格:    48T/96T
小鼠肺炎支原体(MP)抗体(IgG)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse mycoplasma pneumoniae(MP)antibody(IgG)ELISA kit    ,规格:    48T/96T
小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit    ,规格:    48T/96T
小鼠肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse Pulmonary Surfactant-associated protein C,SP-C ELISA kit    ,规格:    48T/96T
小鼠肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse Pulmonary Surfactant-associated protein B,SP-B ELISA kit    ,规格:    48T/96T
小鼠肺表面活性蛋白D(SP-D)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse pulmonary surfactant-associated protein D,SP-D ELISA kit    ,规格:    48T/96T
小鼠肥大细胞类*(MCT)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse Mast Cell Tryptase,MCT ELISA Kit    ,规格:    48T/96T
小鼠肥大/干细胞生长因子受体(Kit/Sl/CD117)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse mast/stem cell growth factor receptor,Kit/Sl/CD117 ELISA Kit    ,规格:    48T/96T

 

 

 


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