【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 杂交瘤细胞；11B6培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
Inhibin Alpha 抑制素α抗原
Inhibin beta A peptide 抑制素beta A抗原
Inhibin beta B 抑制素βB抗原
integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29) 粘附分子整合素β1抗原
Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e) 粘附分子整合素α5抗原
Integrin alpha V/CD51 peptide 整合素αV抗原
JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1) 蛋白质*激酶JAK-1抗原
JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2) 蛋白质*激酶JAK-2抗原
phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008) 磷酸化蛋白*激酶JAK-2抗原
JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3) c-Jun氨基末端激酶1/3多肽抗原
phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 磷酸化氨基末端激酶1/2/3（pJNK1/2/3）抗原马桑Coriaria nepalensis Coniferaldehyde 松柏醛 20649-42-7 C10H10O3 ≥97%
云南含笑Michelia yunnanensis Coniferin 松柏苷 531-29-3 C16H22O8 ≥97.5%
川芎 Ligusticum chuanxiong Hort Coniferyl ferulate 阿魏酸松柏酯 63644-62-2 C20H20O6 ≥98%
非洲马铃果Voacanga africana Conopharyngine 榴花碱 76-98-2 C23H30N2O4 ≥95%
扇开狗牙花Ervatamia flabelliformis Conophylline 长春碱衍生物 142741-24-0 C44H50N4O10 ≥96%
黄连 Chinese goldthread Coptisine chloride 黄连碱 3486-66-6 C19H14NO4 ≥98%
黄连 Coptis chinensis Franch. Coptisine HCL 盐酸黄连碱 6020-18-4 C19H14NO4+ ≥98%
白屈菜ChelidoniummajusL.根 Coptisine Sulfate 硫酸黄连碱 1198398-71-8 C19H14NO4? 1/2H2SO4 ≥98%
大黄栀子Gardenia sootepensis Coronalolide none 268214-51-3 C30H42O5 ≥95%
华山姜Alpinia chinensis Coronarin A 二羟丙*A 119188-33-9 C20H28O2 ≥96%
华山姜Alpinia chinensis Coronarin B 二羟丙*B(细胞毒素) 119188-38-4 C20H30O4 ≥96%
