【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 杂交瘤细胞；2F12培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
CXCR3/CD183 peptide 细胞表面趋化因子受体3抗原
GATA-3(GATA binding factor 3) GATA结合蛋白3抗原
GATA-4(GATA binding factor 4) GATA结合蛋白4抗原
Gax(growth arrest-specific homeobox) 生长终止特异同源盒基因抗原
GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 生长分化因子8抗原
GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 胶质细胞源神经营养因子抗原
GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) 粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子抗原
GPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋白A33(跨膜)抗原茶科植物山茶CamelliaL.的叶 Catechin gallate 儿茶素没食子酸 130405-40-2 C22H18O10 ≥98%
红椿Toona ciliate Catechin pentaacetate 五乙酸儿茶素酯 16198-01-9 C25H24O11 ≥95%
长春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Catharanthine 长春质碱 2468-21-5 C21H24N2O2 ≥98%
长春花 Catharanthus roseus (L.)G. Don Catharanthine Sulfate 硫酸长春质碱 70674-90-7 C21H26N2O6S ≥98%
长春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Catharanthine Tartrate 酒石酸长春质碱 4168-17-6 C21H24N2O2. C4H6O6 ≥98%
青羊参Cynanchum otophvllum Caudatin 告达亭 38395-02-7 C28H42O7 ≥98%
菘蓝Isatis idigotica Caulilexin C 1-甲氧基-3-吲哚乙腈 30536-48-2 C11H10N2O ≥95%
苦参Sophra flavescens Ait Caulophylline N-甲基野靛碱 486-86-2 C12H16N2O ≥98%
千里光Senecio scandens Ceanothic acid 美洲茶酸 21302-79-4 C30H46O5 ≥98%
千里光Senecio scandens Ceanothic acid acetate 乙酸茶酸酯 119533-63-0 C32H48O6 ≥95%
