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上海抚生实业有限公司
小鼠杂交瘤细胞;HB Hepama-18(HP-18)培养细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;HB Hepama-18(HP-18)培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C7
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
产品名称 | 小鼠杂交瘤细胞;HB Hepama-18(HP-18)培养 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
小鼠杂交瘤细胞;HB Hepama-18(HP-18)培养复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
小鼠杂交瘤细胞;HB Hepama-18(HP-18)培养操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
SPPL2B 膜内蛋白酶4抗体
Serine carboxypeptidase 1 *羧肽酶1抗体
ST18 肿瘤抑制蛋白18抗体
SALL1 锌指转录蛋白Sall1抗体
SALL4 锌指转录蛋白Sall4抗体
SOX17 转录因子SOX17抗体
STOML2 溴化丙胺太林相关蛋白2抗体
S100A8 S100钙结合蛋白A8抗体
SIGLEC10 唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素抗体
Sialoadhesin 唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1抗体
SP3 转录因子SP3抗体
SP6 转录因子SP6抗体
SPOP SPOP蛋白抗体
SLC10A1 钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白抗体莲Nelumbo nucifera Gaevth. Liensinine 莲心碱 2586-96-1 C37H42N2O6 ≥98%
莲Nelumbo nucifera Gaevth. Liensinine diperchlorate 5088-90-4 C37H42N2O6. 2(HClO4) ≥98%
莲 Nelumbo nucifera Gaertn Neferine 甲基莲心碱 2292-16-2 C38H44N2O6 ≥98%
连翘 Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl. Forsythiaside 连翘脂素 79916-77-1 C29H36O15 ≥98%
连翘 Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl. Forsythin 连翘苷 487-41-2 C27H34O11 ≥98%
连翘 Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl. Forsythoside B 连翘酯苷B 81525-13-5 C34H44O19 ≥98%
连翘 Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl Isoforsythiaside 异连翘酯苷 C23H26O7 ≥98%
荔枝草 Salvia plebeia R.Br. Homoplantaginin 高车前苷 17680-84-1 C22H22O11 ≥98%
荔*Tripterygium wilfordii Hook. f. Triptolide *甲素 38748-32-2 C20H24O6 ≥98%
小鼠杂交瘤细胞;HB Hepama-18(HP-18)培养*Tripterygium wilfordii Hook. f. Triptolide, 14-deoxy-14-oxo *内酯酮 38647-11-9 C20H22O6 ≥98%
*Tripterygium wilfordii Hook. f. Triptophenolide 雷酚内酯 74285-86-2 C20H24O3 ≥98%
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