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小鼠骨髓瘤细胞系; Lys30-51VH/Hu使用说明书

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所  在  地上海市

更新时间:2017-02-06 10:24:55浏览次数:176次

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产品简介

小鼠骨髓瘤细胞系; Lys30-51VH/Hu使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

产品名称小鼠骨髓瘤细胞系; Lys30-51VH/Hu使用说明书
货期3-5天
发货地上海

细胞名称  小鼠骨髓瘤细胞系; Lys30-51VH/Hu使用说明书
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性  半贴壁生长
特征特性   该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法   1:3传代,3-4天传1次
传代情况  C6
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  未定

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
SAPK3    丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗体
phospho-SAPK3 (Thr183+Tyr185)    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗体
SLC14A2    尿素转运型糖蛋白A2抗体
SLCO3A1    可溶载质转运蛋白3A1抗体
SCOT2    含氧酸*转移酶2A抗体
Salmonella enteritidis    肠炎沙门氏菌抗体
SEC14 like protein 2    SEC14样蛋白2抗体
SEMA4D    跨膜蛋白SEMA4D抗体
ST5    抑癌蛋白5抗体
SMC3    基底膜相关软骨素蛋白多糖抗体
STOML3    嗅觉神经相关蛋白STOML3抗体林泽兰Eupatorium lindleyanum    Jaceosidin    合金欢素    18085-97-7    C17H14O7    ≥98%
裂叶崖角藤Rhaphidophora decursiva    Sesartemin    蒿脂麻木质体    77394-27-5    C23H26O8    ≥95%
蓼科植物掌叶大黄 Rheum palmatum L.    Rhaponticin    土大黄苷    155-58-8    C21H24O9    ≥98%
蓼科植物掌叶大黄 Rheum palmatum L.    Rhein-8-O-beta-D-glucopyranoside    大黄酸-8-O-β-D- 葡萄糖苷    113443-70-2    C21H16CaO11    ≥98%
辽东楤木Aralia elate(Miq.)Seem.    Araloside V    辽东楤木皂苷V    340963-86-2    C54H88O23    ≥98%
辽东楤木Aralia elate(Miq.)Seem.    Araloside VII    辽东楤木皂苷VII    340982-22-1    C54H88O24    ≥98%
辽东楤木Aralia elate(Miq.)Seem.    Araloside X    辽东楤木皂苷X    344911-90-6    C60H98O28    ≥98%
两面针Zanthoxylum nitidum    Cuspidiol    4-[[(2E)-4-羟基-3-甲基-2-丁烯基]氧基]*    51593-96-5    C14H20O3    ≥95%
两面针Zanthoxylum nitidum    p-Coumaryl alcohol    对羟基肉桂醇    3690/5/9    C9H10O2    ≥98%
两面针 Zanthoxylum nitidum (Roxb.)DC.    Nitidine Chloride    氯化两面针碱    13063-04-2    C21H18NO4+    ≥98%
两面针 Zanthoxylum nitidum (Roxb.)DC.    Toddalolactone    毛两面针素    483-90-9    C16H20O6    ≥98%
楝 Melia azedarach L.    Toosendanin    苦楝素    58812-37-6    C30H38O11    ≥98%
莲子心 Nelumbo nucifera    Isoliensinine    异莲心碱    6817-41-0    C37H42N2O6    ≥98%

 

 


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