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小鼠杂交瘤细胞系;MAPR-S2使用说明书

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所  在  地上海市

更新时间:2017-02-06 10:21:16浏览次数:221次

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产品简介

小鼠杂交瘤细胞系;MAPR-S2使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

产品名称小鼠杂交瘤细胞系;MAPR-S2使用说明书
货期3-5天
发货地上海

细胞名称  小鼠杂交瘤细胞系;MAPR-S2使用说明书
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性  半贴壁生长
特征特性   该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法   1:3传代,3-4天传1次
传代情况  C10
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  未定

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
ST14    *蛋白酶14/膜型*蛋白酶1抗体
SIK1    */*蛋白激酶SIK1抗体
Syncytin 1    合胞素1抗体
SDCCAG16    结肠癌抗原16抗体
phospho-Src(Tyr418)    磷酸化Src原癌基因抗体
STAC2    STAC2蛋白抗体
SOX30    转录因子SOX30抗体
SLAIN1    13号染色体开放阅读框32抗体绿茶Green Tea    (-)-Gallocatechin    没食子儿茶素    3371-27-5    C15H14O7    ≥98%
绿茶Green Tea    Gallic Acid    没食子酸    149-91-7    C7H6O5    ≥98%
绿茶 Green Tea    Epigallocatechin Gallate (EGCG)    表没食子儿茶素没 食子酸酯    989-51-5    C22H18O11    ≥98%
鹿蹄草属冬绿Gaultheria procumbens    Gaultherin    冬绿苷    490-67-5    C19H26O12    ≥98%
栌菊木Nouelia insignis    Deacetylxylopic acid    none    6619-95-0    C20H30O3    ≥98%
栌菊木Nouelia insignis    ent-11,16-Epoxy-15-hydroxykauran-19-oic acid    (4ALPHA,11BETA,15BETA,16ALPHA)-11,16-环氧-15-羟基贝壳杉-18-酸    77658-46-9    C20H30O4    ≥95%
栌菊木Nouelia insignis    Paniculoside I    (4alpha,15beta)-15-羟基贝壳杉-16-烯-18-酸 beta-D-吡喃葡萄糖酯    60129-63-7    C26H40O8    ≥90%
芦竹 Arundo donax L.    Gramine    芦竹碱    87-52-5    C11H14N2    ≥98%
芦荟Aloe vera[Syn. Aloe barbadensis]    Chrysophanol    大黄酚    481-74-3    C15H10O4    ≥98%
龙牙草Agrimonia pilosa    Leucoside    堪非醇 3-O-桑布双糖苷    27661-51-4    C26H28O15    ≥95%
龙牙草Agrimonia pilosa    1,2,3,19-Tetrahydroxy-12-ursen-28-oic acid    1,2,3,19-四羟基-12-乌苏烯-28-酸    113558-03-5    C30H48O6    ≥95%

 

 


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