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上海抚生实业有限公司
小鼠杂交瘤细胞系;MAPR-S2使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
产品名称 | 小鼠杂交瘤细胞系;MAPR-S2使用说明书 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞系;MAPR-S2使用说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C10
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
ST14 *蛋白酶14/膜型*蛋白酶1抗体
SIK1 */*蛋白激酶SIK1抗体
Syncytin 1 合胞素1抗体
SDCCAG16 结肠癌抗原16抗体
phospho-Src(Tyr418) 磷酸化Src原癌基因抗体
STAC2 STAC2蛋白抗体
SOX30 转录因子SOX30抗体
SLAIN1 13号染色体开放阅读框32抗体绿茶Green Tea (-)-Gallocatechin 没食子儿茶素 3371-27-5 C15H14O7 ≥98%
绿茶Green Tea Gallic Acid 没食子酸 149-91-7 C7H6O5 ≥98%
绿茶 Green Tea Epigallocatechin Gallate (EGCG) 表没食子儿茶素没 食子酸酯 989-51-5 C22H18O11 ≥98%
鹿蹄草属冬绿Gaultheria procumbens Gaultherin 冬绿苷 490-67-5 C19H26O12 ≥98%
栌菊木Nouelia insignis Deacetylxylopic acid none 6619-95-0 C20H30O3 ≥98%
栌菊木Nouelia insignis ent-11,16-Epoxy-15-hydroxykauran-19-oic acid (4ALPHA,11BETA,15BETA,16ALPHA)-11,16-环氧-15-羟基贝壳杉-18-酸 77658-46-9 C20H30O4 ≥95%
栌菊木Nouelia insignis Paniculoside I (4alpha,15beta)-15-羟基贝壳杉-16-烯-18-酸 beta-D-吡喃葡萄糖酯 60129-63-7 C26H40O8 ≥90%
芦竹 Arundo donax L. Gramine 芦竹碱 87-52-5 C11H14N2 ≥98%
芦荟Aloe vera[Syn. Aloe barbadensis] Chrysophanol 大黄酚 481-74-3 C15H10O4 ≥98%
龙牙草Agrimonia pilosa Leucoside 堪非醇 3-O-桑布双糖苷 27661-51-4 C26H28O15 ≥95%
龙牙草Agrimonia pilosa 1,2,3,19-Tetrahydroxy-12-ursen-28-oic acid 1,2,3,19-四羟基-12-乌苏烯-28-酸 113558-03-5 C30H48O6 ≥95%
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