通信电缆 网络设备 无线通信 云计算|大数据 显示设备 存储设备 网络辅助设备 信号传输处理 多媒体设备 广播系统 智慧城市管理系统 其它智慧基建产品
上海抚生实业有限公司
小鼠杂交瘤细胞;FAK使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;FAK使用说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C10
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
产品名称 | 小鼠杂交瘤细胞;FAK使用说明书 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
phospho-MAP3K7IP1(Thr431) 磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体
phospho-MAPK3(Tyr204) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶3抗体
phospho-MEK2(Ser226) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体
phospho-MEF2D(Ser180) 磷酸化肌细胞特异增强因子2D抗体
phospho-MEF2D(Ser444) 磷酸化肌细胞特异增强因子2D抗体
Phospho-MAPKAPK2(Ser272) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体
phospho-MAPKAPK5(Thr182) 磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体
phospho-MAPKAPK5(Ser93) 磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体
phospho-MAP4K1(Ser171) 磷酸化造血祖细胞激酶抗体
PRAK p38调节/激活蛋白激酶抗体
MEF2D 肌细胞特异增强因子2D抗体
phospho-MAP4K4(Ser801) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
Phospho-MARCKS(Ser170) 磷酸化*蛋白激酶C底物Marcks抗体乌头属 Aconitum carmichaeli Debx 302-27-2 C34H47 ≥98%
升麻Cimicifuga foetida 黄肉楠碱 18642-44-9 C37H56O11 ≥98.5%
肉苁蓉 Cistanche deserticola Y.C.Ma 麦角甾苷 61276-17-3 C29H36O15 ≥98%
直杆桉Eucalyptus maideni (2ALPHA,3BETA,4ALPHA)-2,3,23-三羟基乌苏-12,20(30)-二烯-28-酸 341971-45-7 C30H46O5 ≥97%
羊藿Epimedium brevicornum 粗毛羊藿苷 143601-07-4 C27H28O10 ≥95%
大黄栀子Gardenia sootepensis 腺华素 111917-59-0 C26H34O9 ≥98.5%
美味牛肝菌Boletus calopus 腺嘌呤核苷(腺苷) 58-61-7 C10H13N5O4 ≥95%
夾竹桃Nerium oleander none 88721-09-9 C42H64O17 ≥95%
夾竹桃Nerium oleander 欧夹竹桃甙 35109-93-4 C30H44O7 ≥95%
七叶树科七叶树属植物七叶树 (Aesculus chinensis Bge)的果实 七叶皂苷C 219944-39-5 C55H86O24 ≥98%
七叶树科七叶树属植物七叶树 (Aesculus chinensis Bge)的果实 七叶皂苷D 219944-46-4 C55H86O24 ≥98%
您感兴趣的产品PRODUCTS YOU ARE INTERESTED IN
智慧城市网 设计制作,未经允许翻录必究 .
请输入账号
请输入密码
请输验证码
请输入你感兴趣的产品
请简单描述您的需求
请选择省份