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上海抚生实业有限公司
小鼠杂交瘤细胞;ERK2复苏现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
小鼠杂交瘤细胞;ERK2复苏 | 贴壁生长 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;ERK2复苏
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C10
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
黄皮Clausena lansium 乙酰胺 60-35-5 C2H5NO ≥98%
乌头属 Aconitum L. 乙酰 77181-26-1 C36H49 NO12 ≥98%
三尖杉Cephalotaxus fortunei 乙酰三尖杉碱 24274-60-0 C20H23NO5 ≥95%
紫堇Cordalis bungeana Turez. 乙酰紫堇灵 18797-80-3 C23H23NO6 ≥98%
小芸木Micromelum sp. 乙酰基二氢美味草素 A 94285-22-0 C17H16O7 ≥95%
刺柏Juniperus formosana 乙酰基表* 1180-35-4 C24H24O9 ≥98.5%
华山松Pinus armandii 乙酰基异柏烯酸 52992-82-2 C22H34O4 ≥95%
紫草 Arnebia Root 乙酰紫草素 24502-78-1 C18H18O6 ≥98%
钩吻Gelsemium elegans 熊果酸乙酸酯 7372-30-7 C32H50O4 ≥96%
黄芪Astragalus mongholicus 乙酰黄芪皂苷I 84687-47-8 C47H74O17 ≥98%
纈草Valeriana officinalis L. 乙酰缬草三酯 25161-41-5 C24H32O10 ≥98%
乌头属 Aconitum carmichaeli Debx 乌头原碱 509-20-6 C25H41NO9 ≥98%MSY2 DNA结合蛋白C抗体
MUC5AC 胃粘液素抗体
MSH gamma 促黑细胞激素γ抗体
Methamphetamine 胺抗体
MIC1 结肠癌相关蛋白MIC1抗体
MHC Class II 组织相容复合体β抗体
l-Myc Myc基因肺癌相关蛋白抗体
Megalin 糖蛋白gp330抗体
phospho-MyoD1(Ser200) 磷酸化肌原调节蛋白抗体
MAP4K1 造血祖细胞激酶1抗体
MAP4K4 丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
phospho-MAP3K7IP1(Ser423) 磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体
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