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上海抚生实业有限公司
小鼠杂交瘤细胞;EphA1培养现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
产品名称 | 小鼠杂交瘤细胞;EphA1培养 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;EphA1培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C10
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
MVK 甲羟戊酸激酶抗体
MVD 甲羟戊酸脱羧酶抗体
ME1 胞浆苹果酸酶1抗体
MHC class I 组织相容复合体蛋白1抗体
MFAP3L 微丝相关蛋白3样抗体
MTTP 微粒体甘油三酯转运蛋白
Monoacylglycerol Lipase 单酰甘油脂肪酶抗体
n-Myc 致癌基因n-Myc抗体
MRP3 多药耐药相关蛋白3抗体
MTERF1 线粒体转录终止因子1抗体
Mst2 蛋白激酶MST2抗体金疮小草Ajuga decumbens Thunb 乙酰哈巴苷 6926-14-3 C17H26O11 ≥98%
*味Labiatae Lamiophlomis rotata 8-O-乙酰山栀苷甲酯 57420-46-9 C19H28O12 ≥98%
喜树 Camptothecin acuminate Decene 9-氨基* 91421-43-1 C20H17N3O4 ≥98%
金钱松Pseudolarix kaempferi 9-O-乙酰基-4,4'-二-O-甲基落叶松树脂醇 73354-15-1 C24H30O7 ≥96%
云南松Pinus yunnanensis 15-甲氧基二去氢松香酸 1159913-80-0 C21H30O3 ≥95%
地榆Sanguisorba officinalis none 1190070-91-7 C30H22O10 ≥95%
云南松Pinus yunnanensis 8,11,13-阿松香三烯-7,15,18-三醇 337527-10-3 C20H30O3 ≥95%
罗汉松Podocarpus macrophyllus 松香酸 514-10-3 C20H30O2 ≥95%
相思子Abrus precatorius 红豆碱 21339-55-9 C12H14N2O2 ≥98%
无根藤Cassytha filiformis (+)-脱落酸 21293-29-8 C15H20O4 ≥95%
菊科植物山道年蒿 Artemisia cina Berg.花 滨蒿 A.maritima L.花头 苦艾甙,苦艾素 1362-42-1 C15H18O4 ≥98%
洋槐Robinia pseudoacacia L. 金合欢素 480-44-4 C16H12O5 ≥98%
刺五加 Acanthopanax senticosus(Rupr.et Maxim.)Harms 刺五加皂苷B 114902-16-8 C58H92O25 ≥98%
白簕Acanthopanax trifoliatus none 654663-85-1 C32H48O7 ≥95%
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