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小鼠杂交瘤细胞;EphA1培养

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更新时间:2017-02-04 12:42:30浏览次数:207次

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产品简介

小鼠杂交瘤细胞;EphA1培养现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!

详细介绍

产品名称小鼠杂交瘤细胞;EphA1培养
货期3-5天
发货地上海

细胞名称  小鼠杂交瘤细胞;EphA1培养
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性  半贴壁生长
特征特性   该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。 
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法   1:3传代,2-3天传一代
传代情况  C10
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  同工酶鉴定
染色体  
使用权限  A类

复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
MVK    甲羟戊酸激酶抗体
MVD    甲羟戊酸脱羧酶抗体
ME1    胞浆苹果酸酶1抗体
MHC class I    组织相容复合体蛋白1抗体
MFAP3L    微丝相关蛋白3样抗体
MTTP    微粒体甘油三酯转运蛋白
Monoacylglycerol Lipase    单酰甘油脂肪酶抗体
n-Myc    致癌基因n-Myc抗体
MRP3    多药耐药相关蛋白3抗体
MTERF1    线粒体转录终止因子1抗体
Mst2    蛋白激酶MST2抗体金疮小草Ajuga decumbens Thunb    乙酰哈巴苷    6926-14-3    C17H26O11    ≥98%        
*味Labiatae Lamiophlomis rotata    8-O-乙酰山栀苷甲酯    57420-46-9    C19H28O12    ≥98%        
喜树 Camptothecin acuminate Decene    9-氨基*    91421-43-1    C20H17N3O4    ≥98%        
金钱松Pseudolarix kaempferi    9-O-乙酰基-4,4'-二-O-甲基落叶松树脂醇    73354-15-1    C24H30O7    ≥96%        
云南松Pinus yunnanensis    15-甲氧基二去氢松香酸    1159913-80-0    C21H30O3    ≥95%        
地榆Sanguisorba officinalis    none    1190070-91-7    C30H22O10    ≥95%        
云南松Pinus yunnanensis    8,11,13-阿松香三烯-7,15,18-三醇    337527-10-3    C20H30O3    ≥95%        
罗汉松Podocarpus macrophyllus    松香酸    514-10-3    C20H30O2    ≥95%        
相思子Abrus precatorius    红豆碱    21339-55-9    C12H14N2O2    ≥98%        
无根藤Cassytha filiformis    (+)-脱落酸    21293-29-8    C15H20O4    ≥95%        
菊科植物山道年蒿  Artemisia cina Berg.花 滨蒿 A.maritima L.花头    苦艾甙,苦艾素    1362-42-1    C15H18O4    ≥98%        
洋槐Robinia pseudoacacia L.    金合欢素    480-44-4    C16H12O5    ≥98%        
刺五加 Acanthopanax senticosus(Rupr.et Maxim.)Harms    刺五加皂苷B    114902-16-8    C58H92O25    ≥98%        
白簕Acanthopanax trifoliatus    none    654663-85-1    C32H48O7    ≥95%        

 

 


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