【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；Dynamin-1使用说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交，细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗，可用于基础研究和临床检验。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C10
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
蓝桉Eucalyptus globulus 3-乙酰氧基-11-乌苏烯-28,13-内酯 35959-08-1 C32H48O4 ≥95%
紫茎泽兰Eupatorium adenophorum 3-乙酰氧基-24-羟基达玛-20,25-二烯 143519-04-4 C32H52O3 ≥95%
骆驼蓬Peganum harmala 3-乙酰氧基-27-羟基-20(29)-流明-28-羧酸甲酯 263844-80-0 C33H52O5 ≥95%
紫茎泽兰Eupatorium adenophorum (4R,4AS,6S,8AR)-6-(乙酰基氧基)-3,4,4A,5,6,8A-六氢-4,7-二甲基-1-(1-甲基乙亚基)-2(1H)-萘酮 104975-02-2 C17H24O3 ≥95%
紫茎泽兰Eupatorium adenophorum 3-乙酰氧基-4-杜松萜烯-8-酮 923950-05-4 C17H26O3 ≥95%
华山松Pinus armandii (E)-3-乙酰氧基-5-甲氧基二苯乙烯 71144-78-0 C17H16O3 ≥98%
黄荆Vitex negundo 3-乙酰氧基-8(17),13E-劳丹二烯-15-酸 63399-37-1 C22H34O4 ≥98%
*Tripterygium wilfordii none 62498-83-3 C32H50O5 ≥95%
木犀科植物齐墩果olea europaea l. *3-乙酸酯 4339-72-4 C32H50O4 ≥98%
华山松Pinus armandii 3-邻乙酰基短叶松素 52117-69-8 C17H14O6 ≥97%
南美蟛蜞菊Wedelia trilobata 3ALPHA-当归酰氧基-9BETA-羟基等效贝壳杉-16-烯酸 79406-11-4 C25H36O5 ≥95%
铁刀木Cassia siamea (3R,4S)-REL-4-乙酰基-3,4-二氢-3,6,8-三羟基-3-甲基-1(2H)-萘酮 263368-92-9 C13H14O5 ≥95% MPP7 棕榈酰化膜蛋白7抗体
Marijuana(2B1) 小鼠抗单克隆抗体
MYL1+3 肌球蛋白轻链1/3抗体
phospho-MLC(Ser20) 磷酸化肌球蛋白轻链抗体
MuRF1/Trim63 肌肉细胞特异泛素蛋白连接酶1抗体
MAFbx/Fbx32 泛素蛋白连接酶抗体
MCT2 单羧酸转运蛋白2抗体
MDH1 可溶苹果酸脱氢酶抗体
PKC delta 蛋白激酶C亚D型抗体
Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) 磷酸化μ-型阿片受体抗体
Phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗体
MMP9 基质金属蛋白酶9抗体
MIS12 染色体及有丝分裂蛋白MIS12抗体
MCT1 单羧酸转运蛋白-1抗体
