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小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 RAW264.7使用说明书

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所  在  地上海市

更新时间:2017-02-04 09:44:50浏览次数:470次

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产品简介

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。

详细介绍

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

细胞名称  小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7使用说明书
形态特性   淋巴母细胞样
生长特性  贴壁生长
特征特性   此细胞株源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。 sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。此细胞株不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。 可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。 可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。 LPS或PPD处理2天可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  优质胎牛血清,10%
传代方法   消化30-40分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况  PN5
冻存条件   *培养基+8%DMSO
支原体检测  阴性
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

产品名称小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7使用说明书
货期3-5天
发货地上海

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7使用说明书复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7使用说明书操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
亚硫酸铁琼脂    Sulfite Iron Agar    250g/瓶    用于厌氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌的平板计数
胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤(TPGYT基础)    TPGY BrothTPGY Broth    250g/瓶    用于肉毒梭菌增菌培养,需添加1:250*
厌氧卵黄琼脂基础    Anaerobic Egg Yolk Agar Base    250g/瓶    用于肉毒梭菌增菌分离,每100ml培养基中添加3支50%卵黄盐水悬液
明胶磷酸盐缓冲液    Gelatin PBS Broth    250g/瓶    用于肉毒梭菌和肉毒毒素检样的制备
TSN琼脂    Trypticase Sulfite Neomycin Agar    250g/瓶    用于产气荚膜梭菌的选择性分离和计数
TBB培养基    Tyrobutyricun Broth Base    250g/瓶    用于乳酪产品中梭菌的计数
强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)    Differentia Reinforced Clostridial Agar    250g/瓶    用于食品和其它物质中梭菌的计数和培养
梭菌鉴别琼脂(DCA)    Differentia Clostridial Agar    250g/瓶    用于干燥食品中亚硫酸盐还原梭菌的计数
强化梭菌培养基    Reinforced Clostridium Medium    250g/瓶    用于梭菌的培养
强化梭菌琼脂    Reinforced Clostridium Agar    250g/瓶    用于梭菌的分离培养
强化梭菌鉴别琼脂    Differential Reinforced Clostridial Agar    250g/瓶    用于亚硫酸盐还原梭菌的计数和培养
SC琼脂基础    Sulfite Cycloserine Agar Base    250g/瓶    用于产气荚膜梭菌的计数和培养(ISO),需添加D-环*及50%卵黄盐水悬液
梭状芽孢杆菌计数琼脂    Clostridia Count Agar    250g/瓶    用于厌氧亚硫酸盐梭状芽孢杆菌计数(日本)IFNGR1    干扰素-gamma受体1抗体
IL-1 Alpha Propeptide    白介素1α前肽/IL-1α前肽抗体
ITGA11    整合素α11抗体
IGFL2    胰岛素生长因子样家族成员2抗体
IDI2    异戊烯基焦磷酸异构酶2抗体
ITK    IL-2诱导型T细胞激酶抗体
IGF2AS    IGF2基因的互补基因1蛋白抗体
IFI44L    干扰素诱导蛋白44样蛋白抗体
ITGB4    整合素β4抗体
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7使用说明书IGKV A18    kappa轻链可变区抗体
ICOS/CD278    诱导协同刺激分子CD278抗体
IL-31    白细胞介素31抗体
IL-28A/IFNL2    白细胞介素28A抗体

 

 

 


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